Functional and structural characterization of factor Xa dimer in solution.
Functional and structural characterization of factor Xa dimer in solution.
复制标题
溶液中因子 Xa 二聚体的功能和结构表征。
DOI：
10.1016/j.bpj.2008.10.013
复制
发表时间：
2009
影响因子：
3.4
通讯作者：
Lentz,BarryR
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Chattopadhyay,Rima;Iacob,Roxana;Sen,Shalmali;Majumder,Rinku;Tomer,KennethB;Lentz,BarryR
先前的研究表明，水溶性磷脂酰丝氨酸（C6 PS）与牛凝血因子Xa（FXa）的结合导致溶液中钙离子依赖性二聚化。我们报告的Ca 2+，C6 PS，和二聚化对人和牛FXa的活性和结构的影响。人和牛的二聚体对凝血酶原的活性比单体低106- 107倍，这种降低主要归因于inkcat的大幅降低。二聚化似乎不阻断活性位点，因为对合成底物的酰胺分解活性基本上不受影响。圆二色性揭示了二聚化后三级或四级结构的实质性变化，伴随着α-螺旋的减少。质谱鉴定了催化结构域中的赖氨酸（K270），其似乎被埋在二聚体界面处，并且是据报道干扰因子Va（FVa）结合的合成肽序列的一部分。C6 PS结合暴露K351（报道的FVa结合区的一部分）、K242（邻近催化三联体）和K420（底物外位点的一部分）。我们将我们的结果解释为意味着C6 PS诱导的二聚化产生实质性的构象变化或结构域重排，使得需要PS激活的FXa的结构数据来理解FXa二聚体或FXa-FVa复合物的结构。
Previous studies showed that binding of water-soluble phosphatidylserine (C6PS) to bovine factor Xa (FXa) leads to Ca2+-dependent dimerization in solution. We report the effects of Ca2+, C6PS, and dimerization on the activity and structure of human and bovine FXa. Both human and bovine dimers are 106- to 107-fold less active toward prothrombin than the monomer, with the decrease being attributed mainly to a substantial decrease inkcat. Dimerization appears not to block the active site, since amidolytic activity toward a synthetic substrate is largely unaffected. Circular dichroism reveals a substantial change in tertiary or quaternary structure with a concomitant decrease inα-helix upon dimerization. Mass spectrometry identifies a lysine (K270) in the catalytic domain that appears to be buried at the dimer interface and is part of a synthetic peptide sequence reported to interfere with factor Va (FVa) binding. C6PS binding exposes K351(part of a reported FVa binding region), K242(adjacent to the catalytic triad), and K420(part of a substrate exosite). We interpret our results to mean that C6PS-induced dimerization produces substantial conformational changes or domain rearrangements such that structural data on PS-activated FXa is required to understand the structure of the FXa dimer or the FXa-FVa complex.
登录
查看更多内容
鉴定因子 Xa 中季胺的结合位点。
影响因子：
2.9
作者：
D. Monnaie;D. Arosio;N. Griffon;T. Rose;A. Rezaie;E. Di Cera
通讯作者：
E. Di Cera
配体诱导的寡聚化和调节机制。
DOI：
--
发表时间：
1974
期刊：
CRC Critical Reviews in Biochemistry
影响因子：
--
作者：
A. T. Phillips
通讯作者：
A. T. Phillips
DOI：
10.1016/s0021-9258(18)45150-2
发表时间：
1987-09
期刊：
The Journal of biological chemistry
影响因子：
--
作者：
E. Husten;C. Esmon;A. Johnson
通讯作者：
E. Husten;C. Esmon;A. Johnson
影响因子：
20.3
作者：
Rinku Majumder;M. Quinn-Allen;W. Kane;B. Lentz
通讯作者：
Rinku Majumder;M. Quinn-Allen;W. Kane;B. Lentz
影响因子：
15.9
作者：
GRZESIAK, JJ;PIERSCHBACHER, MD
通讯作者：
PIERSCHBACHER, MD