Interaction of Insulin Receptor Substrate-1 with the ς3A Subunit of the Adaptor Protein Complex-3 in Cultured Adipocytes*
Interaction of Insulin Receptor Substrate-1 with the ς3A Subunit of the Adaptor Protein Complex-3 in Cultured Adipocytes*
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培养脂肪细胞中胰岛素受体底物 1 与衔接蛋白复合物 3 的 ς3A 亚基的相互作用*
DOI：
--
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发表时间：
1998
影响因子：
4.8
通讯作者：
R. Heller
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
B. Vanrenterghem;M. Morin;M. Czech;R. Heller
胰岛素受体酪氨酸激酶（insulin receptor tyrosine kinase, IRS-1）在胰岛素作用下的自磷酸化和随后底物蛋白（insulin receptor substrate-1, IRS-1）的酪氨酸磷酸化是胰岛素受体酪氨酸激酶的信号传导途径。在基础3T3-L1脂肪细胞中，IRS-1主要是膜结合的，这种定位可能对靶向介导胰岛素作用的下游信号元件很重要。由于IRS-1可能通过与特定膜蛋白的结合而定位到膜上，因此我们用非酪氨酸磷酸化的杆状病毒表达的IRS-1筛选3T3-F442A脂肪细胞cDNA表达文库，以鉴定潜在的IRS-1受体。一个编码AP-3接头蛋白复合物的小亚基（小亚基）的cDNA克隆被证明可以利用这种克隆策略与IRS-1结合。利用杆状病毒表达的IRS-1和谷胱甘肽s转移酶(GST)-阶梯3a融合蛋白进行体外结合研究，进一步验证了IRS-1与阶梯3a之间的特异性相互作用。从3T3-L1脂肪细胞中分离出的低密度膜，发现IRS-1和阶梯状细胞在耐洗涤剂的低密度膜中共分离。重要的是，在低密度膜上添加外源纯化的GST- 163a，几乎释放了所有结合在这些膜上的IRS-1，而单独使用GST没有效果。这些结果与假设一致，即阶梯3a作为IRS-1受体可能决定了IRS-1的亚细胞定位和信号功能。
Signaling through the insulin receptor tyrosine kinase involves its autophosphorylation in response to insulin and the subsequent tyrosine phosphorylation of substrate proteins such as insulin receptor substrate-1 (IRS-1). In basal 3T3-L1 adipocytes, IRS-1 is predominantly membrane-bound, and this localization may be important in targeting downstream signaling elements that mediate insulin action. Since IRS-1 localization to membranes may occur through its association with specific membrane proteins, a 3T3-F442A adipocyte cDNA expression library was screened with non-tyrosine-phosphorylated, baculovirus-expressed IRS-1 in order to identify potential IRS-1 receptors. A cDNA clone that encodes ς3A, a small subunit of the AP-3 adaptor protein complex, was demonstrated to bind IRS-1 utilizing this cloning strategy. The specific interaction between IRS-1 and ς3A was further verified by in vitro binding studies employing baculovirus-expressed IRS-1 and a glutathione S-transferase (GST)-ς3A fusion protein. IRS-1 and ς3A were found to co-fractionate in a detergent-resistant population of low density membranes isolated from basal 3T3-L1 adipocytes. Importantly, the addition of exogenous purified GST-ς3A to low density membranes caused the release of virtually all of the IRS-1 bound to these membranes, while GST alone had no effect. These results are consistent with the hypothesis that ς3A serves as an IRS-1 receptor that may dictate the subcellular localization and the signaling functions of IRS-1.
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小鼠脂肪细胞中胰岛素诱导的 160 kDa 磷酸酪氨酸蛋白是胰岛素受体底物 1：通过克隆鉴定。
DOI：
10.1016/0167-4781(93)90222-y
发表时间：
1993
期刊：
Biochimica et biophysica acta
影响因子：
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作者：
Keller,SR;Aebersold,R;Garner,CW;Lienhard,GE
通讯作者：
Lienhard,GE
160,000 Da 磷酸酪氨酰蛋白的分离和表征，该蛋白是胰岛素信号传导的假定参与者。
DOI：
--
发表时间：
1991
期刊：
The Journal of biological chemistry
影响因子：
--
作者：
Keller,SR;Kitagawa,K;Aebersold,R;Lienhard,GE;Garner,CW
通讯作者：
Garner,CW
分离的大鼠脂肪细胞中的磷脂酰肌醇-3-激酶。
DOI：
--
发表时间：
1992
期刊：
The Journal of biological chemistry
影响因子：
--
作者：
Kelly,KL;Ruderman,NB;Chen,KS
通讯作者：
Chen,KS
蛋白质合成抑制剂可激活葡萄糖转运，而不增加 3T3-L1 脂肪细胞中质膜葡萄糖转运蛋白。
DOI：
--
发表时间：
1991
期刊：
The Journal of biological chemistry
影响因子：
--
作者：
Clancy,BM;Harrison,SA;Buxton,JM;Czech,MP
通讯作者：
Czech,MP
影响因子：
56.9
作者：
BRODSKY, FM
通讯作者：
BRODSKY, FM