Strategic single point mutation yields a solvent- and salt-stable transaminase from Virgibacillus sp. in soluble form.
Strategic single point mutation yields a solvent- and salt-stable transaminase from Virgibacillus sp. in soluble form.
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DOI：
10.1038/s41598-018-34434-3
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发表时间：
2018-11-06
影响因子：
4.6
通讯作者：
Molinari F
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Guidi B;Planchestainer M;Contente ML;Laurenzi T;Eberini I;Gourlay LJ;Romano D;Paradisi F;Molinari F
从耐盐海洋细菌Virgibacillus 21D基因组中鉴定出一个新的转氨酶（VbTA）。在大肠杆菌中异种表达后，它完全位于不溶性部分。单突变后，通过序列同源性分析鉴定，VbTA T16F突变体成功地以可溶性形式表达并表征。VbTA T16F对极性有机溶剂和盐暴露具有较高的稳定性，主要接受疏水性芳香胺和羰基底物。本文报道了VbTA T16F的2.0 Å分辨率晶体结构，并结合计算计算，揭示了该突变对于正确的二聚化和正确的折叠至关重要，从而导致可溶性蛋白的表达。
A new transaminase (VbTA) was identified from the genome of the halotolerant marine bacterium Virgibacillus 21D. Following heterologous expression in Escherichia coli, it was located entirely in the insoluble fraction. After a single mutation, identified via sequence homology analyses, the VbTA T16F mutant was successfully expressed in soluble form and characterised. VbTA T16F showed high stability towards polar organic solvents and salt exposure, accepting mainly hydrophobic aromatic amine and carbonyl substrates. The 2.0 Å resolution crystal structure of VbTA T16F is here reported, and together with computational calculations, revealed that this mutation is crucial for correct dimerisation and thus correct folding, leading to soluble protein expression.
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影响因子：
5.4
作者：
DasSarma S;DasSarma P
通讯作者：
DasSarma P
影响因子：
3
作者：
Pettersen, EF;Goddard, TD;Ferrin, TE
通讯作者：
Ferrin, TE
DOI：
10.1016/s0969-2126(00)00085-x
发表时间：
2000-01-15
期刊：
STRUCTURE WITH FOLDING & DESIGN
影响因子：
--
作者：
Schneider, G;Käck, H;Lindqvist, Y
通讯作者：
Lindqvist, Y
影响因子：
56.9
作者：
Savile, Christopher K.;Janey, Jacob M.;Hughes, Gregory J.
通讯作者：
Hughes, Gregory J.
影响因子：
3
作者：
De Vitis, Valerio;Guidi, Benedetta;Romano, Diego
通讯作者：
Romano, Diego