Red light, green light: probing single molecules using alternating-laser excitation.

Red light, green light: probing single molecules using alternating-laser excitation.
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红光、绿光:使用交替激光激发探测单分子。

DOI:
10.1042/bst0360738
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发表时间:
2008
影响因子:
3.9
通讯作者:
Kapanidis,AchillefsN
Kapanidis,AchillefsN
中科院分区:
生物学3区
文献类型:
--
作者:
Santoso,Yusdi;Hwang,LingChin;LeReste,Ludovic;Kapanidis,AchillefsN

文献摘要

参考文献

被引文献

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单分子荧光方法,特别是单分子FRET(荧光共振能量转移),为生物系统的结构,相互作用和动力学提供了新的见解。ALEX(交替激光激发)光谱是一种新的方法,通过提供有关结构和化学计量的同时信息扩展单分子FRET;这种新的信息允许在没有FRET的情况下检测相互作用,并扩展了通过FRET可访问的距离测量的动态范围。在本文中,我们讨论了ALEX与共聚焦显微镜的组合,用于研究溶液中和凝胶中的分子;我们还讨论了将ALEX与TIRF(全内反射荧光)相结合,用于研究表面固定的分子。我们还强调ALEX的蛋白质-核酸相互作用的研究中的应用。
Single-molecule fluorescence methods, particularly single-molecule FRET (fluorescence resonance energy transfer), have provided novel insights into the structure, interactions and dynamics of biological systems. ALEX (alternating-laser excitation) spectroscopy is a new method that extends single-molecule FRET by providing simultaneous information about structure and stoichiometry; this new information allows the detection of interactions in the absence of FRET and extends the dynamic range of distance measurements that are accessible through FRET. In the present article, we discuss combinations of ALEX with confocal microscopy for studying in-solution and in-gel molecules; we also discuss combining ALEX with TIRF (total internal reflection fluorescence) for studying surface-immobilized molecules. We also highlight applications of ALEX to the study of protein–nucleic acid interactions.
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