N-terminal T4 lysozyme fusion facilitates crystallization of a G protein coupled receptor.
N-terminal T4 lysozyme fusion facilitates crystallization of a G protein coupled receptor.
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DOI：
10.1371/journal.pone.0046039
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发表时间：
2012
期刊：
影响因子：
3.7
通讯作者：
Kobilka BK
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Zou Y;Weis WI;Kobilka BK
将高度结晶的T4溶菌酶（T4 L）与β2肾上腺素能受体（β2AR）的N端融合，后者是一种G蛋白偶联受体（GPCR）。我们证明，N-末端融合的T4 L是足够的刚性相对于受体，以促进结晶没有热稳定突变或使用的稳定抗体，G蛋白，或蛋白质融合到第3胞内环。这种方法增加了蛋白质工程策略，使单独或与信号伴侣复合的GPCR的晶体学研究成为可能。
A highly crystallizable T4 lysozyme (T4L) was fused to the N-terminus of the β2 adrenergic receptor (β2AR), a G-protein coupled receptor (GPCR) for catecholamines. We demonstrate that the N-terminal fused T4L is sufficiently rigid relative to the receptor to facilitate crystallogenesis without thermostabilizing mutations or the use of a stabilizing antibody, G protein, or protein fused to the 3rd intracellular loop. This approach adds to the protein engineering strategies that enable crystallographic studies of GPCRs alone or in complex with a signaling partner.
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DOI：
10.1126/science.1194396
发表时间：
2010-11-19
期刊：
Science (New York, N.Y.)
影响因子：
--
作者：
Wu B;Chien EY;Mol CD;Fenalti G;Liu W;Katritch V;Abagyan R;Brooun A;Wells P;Bi FC;Hamel DJ;Kuhn P;Handel TM;Cherezov V;Stevens RC
通讯作者：
Stevens RC
DOI：
10.1107/s0907444904019158
发表时间：
2004-12-01
影响因子：
2.2
作者：
Emsley, P;Cowtan, K
通讯作者：
Cowtan, K
影响因子：
4.8
作者：
KOZASA, T;GILMAN, AG
通讯作者：
GILMAN, AG
强大的体积溶剂校正和各向异性缩放程序。
DOI：
10.1107/s0907444905007894
发表时间：
2005-07
期刊：
Acta crystallographica. Section D, Biological crystallography
影响因子：
--
作者：
Afonine PV;Grosse-Kunstleve RW;Adams PD
通讯作者：
Adams PD
DOI：
10.1107/s0907444909042073
发表时间：
2010-01
期刊：
Acta crystallographica. Section D, Biological crystallography
影响因子：
--
作者：
Chen VB;Arendall WB 3rd;Headd JJ;Keedy DA;Immormino RM;Kapral GJ;Murray LW;Richardson JS;Richardson DC
通讯作者：
Richardson DC