Protein purification with polymeric affinity membranes containing functionalized poly(acid) brushes.
Protein purification with polymeric affinity membranes containing functionalized poly(acid) brushes.
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DOI：
10.1021/bm9014792
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发表时间：
2010-04-12
影响因子：
6.2
通讯作者：
Bruening, Merlin L.
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Jain, Parul;Vyas, Mukesh Kumar;Geiger, James H.;Baker, Gregory L.;Bruening, Merlin L.
用聚（酸）刷及其衍生物修饰的多孔尼龙膜可以通过离子交换和金属离子亲和作用快速纯化蛋白质。含有聚（2-（甲基丙烯酰氧基）乙基琥珀酸酯）（聚（MES））刷的膜每cm 3膜结合118 ± 8 mg溶菌酶，并促进从鸡蛋白色中纯化溶菌酶。此外，聚（MES）刷与次氮基三乙酸酯（NTA）-Ni 2+复合物的功能化产生了结合聚（组氨酸）标记的（His标记的）泛素的膜，其能力为85 ± 2 mg蛋白质/cm 3膜。最重要的是，用聚（MES）-NTA-Ni 2+修饰的膜允许在不到10分钟内直接从细胞提取物中分离His标记的细胞视黄醇结合蛋白，并且蛋白质纯度与用商业亲和柱实现的相当。因此，多孔尼龙膜含有功能化聚（MES）刷是有吸引力的候选人快速，高容量的纯化His标记的蛋白质从细胞提取物。
Porous nylon membranes modified with poly(acid) brushes and their derivatives can rapidly purify proteins via ion-exchange and metal-ion affinity interactions. Membranes containing poly(2-(methacryloyloxy)ethyl succinate) (poly(MES)) brushes bind 118 ± 8 mg of lysozyme per cm3 of membrane and facilitate purification of lysozyme from chicken egg white. Moreover, functionalization of the poly(MES) brushes with nitrilotriacetate (NTA)-Ni2+ complexes yields membranes that bind poly(histidine)-tagged (His-tagged) ubiquitin with a capacity of 85 ± 2 mg of protein per cm3 of membrane. Most importantly, the membranes modified with poly(MES)-NTA-Ni2+ allow isolation of His-tagged cellular retinaldehyde-binding protein directly from a cell extract in less than 10 min, and the protein purity is comparable to that achieved with commercial affinity columns. Thus, porous nylon membranes containing functionalized poly(MES) brushes are attractive candidates for rapid, high-capacity purification of His-tagged proteins from cell extracts.
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DOI：
10.1038/nbt0788-779
发表时间：
1988-07-01
期刊：
BIO-TECHNOLOGY
影响因子：
--
作者：
BRANDT, S;GOFFE, RA;ZALE, SE
通讯作者：
ZALE, SE
影响因子：
5.5
作者：
Jain, Parul;Dai, Jinhua;Bruening, Merlin L.
通讯作者：
Bruening, Merlin L.
影响因子：
9.5
作者：
Gautrot, Julien E.;Huck, Wilhelm T. S.;Ramstedt, Madeleine
通讯作者：
Ramstedt, Madeleine
影响因子：
2.6
作者：
Kawakita, Hidetaka;Masunaga, Hiroyasu;Tsuneda, Satoshi
通讯作者：
Tsuneda, Satoshi
影响因子：
3.3
作者：
Czeslik, C;Jackler, G;Ballauff, M
通讯作者：
Ballauff, M