In situ structures of the segmented genome and RNA polymerase complex inside a dsRNA virus.
In situ structures of the segmented genome and RNA polymerase complex inside a dsRNA virus.
复制标题
dsRNA 病毒内分段基因组和 RNA 聚合酶复合物的原位结构
DOI：
10.1038/nature15767
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发表时间：
2015-11-26
期刊：
影响因子：
64.8
通讯作者：
Zhou, Z. Hong
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Zhang, Xing;Ding, Ke;Yu, Xuekui;Chang, Winston;Sun, Jingchen;Zhou, Z. Hong
呼肠孤病毒科的病毒，如三壳人类轮状病毒和单壳昆虫细胞质多角体病毒（CPV），都在病毒衣壳内包装了分段双链RNA（dsRNA）的基因组，并进行内源性信使RNA合成通过转录酶复合物（TEC）。通过直接电子计数冷冻电子显微镜和不对称重建，我们已经确定了组织的dsRNA基因组内的静止CPV（q-CPV）和原位原子结构的TEC内CPV在静止和转录（t-CPV）状态。我们发现CPV中的10个片段化dsRNA以特定的非对称方式与10个TEC组织在一起，每个dsRNA片段直接连接到TEC。TEC由两个广泛相互作用的亚基组成：RNA依赖性RNA聚合酶（RdRP）和NTR VP 4。我们发现，手镯结构域的RdRP发生显着的构象变化时，q-CPV转化为t-CPV，导致形成的RNA模板进入通道和访问的聚合酶活性位点。来自衣壳壳蛋白（CSP）的两个亚基中的每一个的氨基末端螺旋与VP 4和RdRP相互作用。
Viruses in the Reoviridae, like the triple-shelled human rotavirus and the single-shelled insect cytoplasmic polyhedrosis virus (CPV), all package a genome of segmented double-stranded RNAs (dsRNAs) inside the viral capsid and carry out endogenous messenger RNA synthesis through a transcriptional enzyme complex (TEC). By direct electron-counting cryoelectron microscopy and asymmetric reconstruction, we have determined the organization of the dsRNA genome inside quiescent CPV (q-CPV) and the in situ atomic structures of TEC within CPV in both quiescent and transcribing (t-CPV) states. We show that the ten segmented dsRNAs in CPV are organized with ten TECs in a specific, non-symmetric manner, with each dsRNA segment attached directly to a TEC. The TEC consists of two extensively interacting subunits: an RNA-dependent RNA polymerase (RdRP) and an NTPase VP4. We find that the bracelet domain of RdRP undergoes marked conformational change when q-CPV is converted to t-CPV, leading to formation of the RNA template entry channel and access to the polymerase active site. An amino-terminal helix from each of two subunits of the capsid shell protein (CSP) interacts with VP4 and RdRP.
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影响因子：
6.8
作者：
Choi, Kyung H.;Rossmann, Michael G.
通讯作者：
Rossmann, Michael G.
DOI：
10.1107/s0907444904019158
发表时间：
2004-12-01
影响因子：
2.2
作者：
Emsley, P;Cowtan, K
通讯作者：
Cowtan, K
影响因子：
64.8
作者：
Grimes, JM;Burroughs, JN;Stuart, DI
通讯作者：
Stuart, DI
影响因子：
5.4
作者：
McDonald, Sarah M.;Patton, John T.
通讯作者：
Patton, John T.
DOI：
10.1107/s0907444909052925
发表时间：
2010-02
期刊：
Acta crystallographica. Section D, Biological crystallography
影响因子：
--
作者：
Adams PD;Afonine PV;Bunkóczi G;Chen VB;Davis IW;Echols N;Headd JJ;Hung LW;Kapral GJ;Grosse-Kunstleve RW;McCoy AJ;Moriarty NW;Oeffner R;Read RJ;Richardson DC;Richardson JS;Terwilliger TC;Zwart PH
通讯作者：
Zwart PH