Measuring protein-ligand interactions using liquid sample desorption electrospray ionization mass spectrometry.
Measuring protein-ligand interactions using liquid sample desorption electrospray ionization mass spectrometry.
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DOI：
10.1021/ac402906d
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发表时间：
2013-12-17
影响因子：
7.4
通讯作者：
Loo, Joseph A.
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Liu, Pengyuan;Zhang, Jiang;Ferguson, Carly N.;Chen, Hao;Loo, Joseph A.
我们先前已经表明，液体样品解吸电喷雾电离质谱法（ESI-MS）能够测量大蛋白质和非共价结合的蛋白质复合物（至150 kDa）（Ferguson等人，Anal. 2011，83，6468-6473）。在这项研究中，我们进一步研究了液体样品的反相离子阱质谱探测蛋白质配体相互作用的应用。液体样品DESI允许通过将配体喷向单独的蛋白质样品溶液直接形成完整的蛋白质-配体络合物离子。这种类型的“反应性”DESI方法可以提供关于结合化学计量学、选择性和动力学的快速信息，如通过核糖核酸酶A（RNaseA，13.7 kDa）与胞苷核苷酸配体的结合和溶菌酶（14.3 kDa）与乙酰基甲壳糖配体的结合所证明的。通过液体样品DESI筛选配体的更高通量的方法被证明，其中不同的配体作为分段流被顺序注入用于DESI电离。此外，增压，以提高分析物电荷可以集成与液体样品的电喷雾质谱，而不干扰蛋白质-配体复合物的形成。
We have shown previously that liquid sample desorption electrospray ionization-mass spectrometry (DESI-MS) is able to measure large proteins and noncovalently-bound protein complexes (to 150 kDa) (Ferguson et al., Anal. Chem. 2011, 83, 6468-6473). In this study, we further investigate the application of liquid sample DESI-MS to probe protein-ligand interactions. Liquid sample DESI allows the direct formation of intact protein-ligand complex ions by spraying ligands toward separate protein sample solutions. This type of “reactive” DESI methodology can provide rapid information on binding stiochiometry, selectivity, and kinetics, as demonstrated by the binding of ribonuclease A (RNaseA, 13.7 kDa) with cytidine nucleotide ligands and the binding of lysozyme (14.3 kDa) with acetyl chitose ligands. A higher throughput method for ligand screening by liquid sample DESI was demonstrated, in which different ligands were sequentially injected as a segmented flow for DESI ionization. Furthermore, supercharging to enhance analyte charge can be integrated with liquid sample DESI-MS without interfering with the formation of protein-ligand complexes.
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影响因子：
7.4
作者：
Cody, RB;Laramée, JA;Durst, HD
通讯作者：
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Chen, H;Cotte-Rodríguez, I;Cooks, RG
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作者：
Günther, A;Jhunjhunwala, M;Jensen, KF
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DOI：
10.1016/0006-291x(70)91061-2
发表时间：
1970-01-01
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作者：
HOLLER, E;RUPLEY, JA;HESS, GP
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HESS, GP
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作者：
Li, Jinxi;Shefcheck, Kevin;Fenselau, Catherine
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