Exponential megapriming PCR (EMP) cloning--seamless DNA insertion into any target plasmid without sequence constraints.
Exponential megapriming PCR (EMP) cloning--seamless DNA insertion into any target plasmid without sequence constraints.
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指数兆酸PCR（EMP）克隆 - 无缝DNA插入在任何靶质粒中，没有序列约束。
DOI：
10.1371/journal.pone.0053360
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发表时间：
2012
期刊：
影响因子：
3.7
通讯作者：
Schwartz TU
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Ulrich A;Andersen KR;Schwartz TU
我们提出了一种快速、可靠和廉价的无限制克隆方法，可以无缝地将DNA插入到任何质粒中，而不受序列限制。指数聚合酶链式反应(EMP)克隆需要两个连续的聚合酶链式反应步骤，可以在一天内完成。我们发现，EMP克隆比无限制(RF)克隆有更高的效率，特别是对于2.5kb以上的长插入片段。EMP还可以同时克隆多个插入物。
We present a fast, reliable and inexpensive restriction-free cloning method for seamless DNA insertion into any plasmid without sequence limitation. Exponential megapriming PCR (EMP) cloning requires two consecutive PCR steps and can be carried out in one day. We show that EMP cloning has a higher efficiency than restriction-free (RF) cloning, especially for long inserts above 2.5 kb. EMP further enables simultaneous cloning of multiple inserts.
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