Use of a novel method to find substrates of protein kinase C delta identifies M2 pyruvate kinase.
Use of a novel method to find substrates of protein kinase C delta identifies M2 pyruvate kinase.
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使用寻找蛋白激酶 C δ 底物的新方法鉴定了 M2 丙酮酸激酶。
DOI：
10.1016/j.biocel.2007.01.018
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发表时间：
2007
期刊：
影响因子：
--
通讯作者：
Mochly-Rosen,Daria
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Siwko,Stefan;Mochly-Rosen,Daria
蛋白激酶C(PKC)家族成员参与了多种细胞过程。然而，确定每个PKC同工酶的底物仍然是一个挑战。在这里，我们描述了一种使用二维(2D)等电聚焦凝胶电泳法在MCF-7乳腺癌细胞中鉴定DeltaPKC底物(δPKC)的方法。我们证明M2丙酮酸激酶是δ蛋白激酶C的底物，并用免疫沉淀法进一步研究了M2丙酮酸激酶与δ蛋白激酶C的相互作用。在体外或细胞内激活δ蛋白激酶C似乎不会改变M2丙酮酸激酶的酶活性或聚合。
Protein kinase C (PKC) family members have been implicated in numerous cellular processes. However, identifying the substrates of each PKC isozyme remains a challenge. Here, we describe a method using two-dimensional (2D) isoelectric focusing gel electrophoresis to identify substrates of delta PKC (δPKC) in MCF-7 breast carcinoma cells. We show that M2 pyruvate kinase is a substrate of δPKC, and further characterize the interaction between M2 pyruvate kinase and δPKC in MCF-7 cells by immunoprecipitation. δPKC activation in vitro or in cells did not appear to alter the enzyme activity or polymerization of M2 pyruvate kinase.
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