Cdk9 T-loop phosphorylation is regulated by the calcium signaling pathway.
Cdk9 T-loop phosphorylation is regulated by the calcium signaling pathway.
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DOI：
10.1002/jcp.22760
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发表时间：
2012-02
影响因子：
5.6
通讯作者：
Rice, Andrew P.
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Ramakrishnan, Rajesh;Rice, Andrew P.
真核RNA聚合酶II转录延伸是一个严格调控的过程，依赖于正转录延伸因子-b （P-TEFb）。核心P-TEFb复合物由Cdk9和Cyclin T组成，对大多数蛋白质编码基因的表达至关重要。Cdk9激酶的功能依赖于其t环中Thr186的磷酸化。在这项研究中，我们研究了影响Cdk9 t环磷酸化的激酶和信号通路。在HeLa细胞中使用RNAi筛选，我们发现Cdk9 t环磷酸化是由钙/钙调蛋白依赖性激酶1D （CaMK1D）调节的。在HeLa细胞和原发CD4+ T淋巴细胞中使用小分子抑制剂，我们发现Ca2+信号通路是Cdk9 T环磷酸化所必需的。Ca2+信号的抑制导致Thr186对Cdk9的去磷酸化。在报告质粒试验中，Ca2+信号通路的抑制抑制了PCNA启动子和HIV-1 LTR的Tat转激活，但不抑制HTLV-1 LTR的HTLV-1 Tax转激活，这表明Ca2+通路的扰动和Cdk9 t环磷酸化的减少抑制了对P-TEFb功能有严格要求的转录单位。
Eukaryotic RNA polymerase II transcriptional elongation is a tightly regulated process and is dependent upon positive transcription elongation factor-b (P-TEFb). The core P-TEFb complex is composed of Cdk9 and Cyclin T and is essential for the expression of most protein coding genes. Cdk9 kinase function is dependent upon phosphorylation of Thr186 in its T-loop. In this study, we examined kinases and signaling pathways that influence Cdk9 T-loop phosphorylation. Using an RNAi screen in HeLa cells, we found that Cdk9 T-loop phosphorylation is regulated by Calcium/Calmodulin- dependent kinase 1D (CaMK1D). Using small molecules inhibitors in HeLa cells and primary CD4+ T lymphocytes, we found that the Ca2+ signaling pathway is required for Cdk9 T-loop phosphorylation. Inhibition of Ca2+ signaling led to dephosphorylation of Thr186 on Cdk9. In reporter plasmid assays, inhibition of the Ca2+ signaling pathway repressed the PCNA promoter and HIV-1 Tat transactivation of the HIV-1 LTR, but not HTLV-1 Tax transactivation of the HTLV-1 LTR, suggesting that perturbation of the Ca2+ pathway and reduction of Cdk9 T-loop phosphorylation inhibits transcription units that have a rigorous requirement for P-TEFb function.
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DOI：
10.4161/cc.9.9.11346
发表时间：
2010-05
期刊：
Cell cycle (Georgetown, Tex.)
影响因子：
--
作者：
Cho S;Schroeder S;Ott M
通讯作者：
Ott M
影响因子：
4.8
作者：
Kahl, CR;Means, AR
通讯作者：
Means, AR
影响因子：
64.5
作者：
Guenther, Matthew G.;Levine, Stuart S.;Young, Richard A.
通讯作者：
Young, Richard A.
影响因子：
11.4
作者：
Baumli, Sonja;Lolli, Graziano;Johnson, Louise N.
通讯作者：
Johnson, Louise N.
影响因子：
7.5
作者：
Bres, Vanessa;Yoh, Sunnie M.;Jones, Katherine A.
通讯作者：
Jones, Katherine A.