Tunable Wide-Field Illumination and Single-Molecule Photoswitching with a Single MEMS Mirror.
Tunable Wide-Field Illumination and Single-Molecule Photoswitching with a Single MEMS Mirror.
复制标题
DOI：
10.1021/acsphotonics.1c00843
复制
发表时间：
2021-09-15
期刊：
影响因子：
7
通讯作者：
van de Linde S
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Herdly L;Janin P;Bauer R;van de Linde S
单分子定位显微镜（SMLM）中的均匀照明是超分辨率图像定量分析的关键。因此，已经引入了不同的平场照明方法作为传统高斯照明的替代方案。在这里，我们介绍了一个单一的微机电系统（MEMS）反射镜作为一个可调的和具有成本效益的设备，以适应在SMLM宽场照明。在平场模式下，MEMS允许在整个视场内实现一致的SMLM指标。采用单分子光开关，我们开发了一个简单而强大的例程基准不同的照明方案的基础上，本地发射亮度和ON状态的寿命。此外，我们建议，调整MEMS超出最佳平场条件，使研究在一个单一的收购光开关荧光团的动力学。
Homogeneous illumination in single-molecule localization microscopy (SMLM) is key for the quantitative analysis of super-resolution images. Therefore, different approaches for flat-field illumination have been introduced as alternative to the conventional Gaussian illumination. Here, we introduce a single microelectromechanical systems (MEMS) mirror as a tunable and cost-effective device for adapting wide-field illumination in SMLM. In flat-field mode the MEMS allowed for consistent SMLM metrics across the entire field of view. Employing single-molecule photoswitching, we developed a simple yet powerful routine to benchmark different illumination schemes on the basis of local emitter brightness and ON-state lifetime. Moreover, we propose that tuning the MEMS beyond optimal flat-field conditions enables to study the kinetics of photoswitchable fluorophores within a single acquisition.
登录
查看更多内容
影响因子：
48
作者：
Dempsey, Graham T.;Vaughan, Joshua C.;Chen, Kok Hao;Bates, Mark;Zhuang, Xiaowei
通讯作者：
Zhuang, Xiaowei
影响因子：
35
作者：
通讯作者：
--
影响因子：
16.6
作者：
Ehmann, Nadine;van de Linde, Sebastian;Alon, Amit;Ljaschenko, Dmitrij;Keung, Xi Zhen;Holm, Thorge;Rings, Annika;DiAntonio, Aaron;Hallermann, Stefan;Ashery, Uri;Heckmann, Manfred;Sauer, Markus;Kittel, Robert J.
通讯作者：
Kittel, Robert J.
用于单分子定位显微镜的可切换荧光团。
影响因子：
62.1
作者：
Li H;Vaughan JC
通讯作者：
Vaughan JC
优化单分子定位显微镜的成像速度和激发强度。
影响因子：
48
作者：
Diekmann R;Kahnwald M;Schoenit A;Deschamps J;Matti U;Ries J
通讯作者：
Ries J