Detecting individual extracellular vesicles using a multicolor in situ proximity ligation assay with flow cytometric readout.
Detecting individual extracellular vesicles using a multicolor in situ proximity ligation assay with flow cytometric readout.
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DOI：
10.1038/srep34358
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发表时间：
2016-09-29
影响因子：
4.6
通讯作者：
Kamali-Moghaddam M
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Löf L;Ebai T;Dubois L;Wik L;Ronquist KG;Nolander O;Lundin E;Söderberg O;Landegren U;Kamali-Moghaddam M
流式细胞术是对单个细胞进行定量和定性分析的有力方法。然而，细胞外囊泡（EV）和存在于其表面上的蛋白质的流式细胞术分析受到EV的小尺寸的阻碍-特别是对于最小的EV，其直径可以小至40 nm，存在的抗原数量有限，以及它们的低折射率。我们通过使用多重和原位邻近连接试验（原位PLA）解决了通过流式细胞术检测和表征EV的这些限制，允许使用常规流式细胞仪在背景噪声上容易地记录每个检测到的EV。通过靶向表面上对不同类别的EV具有特异性的蛋白质组，该方法允许选择性识别含有多于一种类型的EV的样品中的EV群体。本文提出的方法打开了使用流式细胞术对EV进行表征和定量的分析。
Flow cytometry is a powerful method for quantitative and qualitative analysis of individual cells. However, flow cytometric analysis of extracellular vesicles (EVs), and the proteins present on their surfaces has been hampered by the small size of the EVs – in particular for the smallest EVs, which can be as little as 40 nm in diameter, the limited number of antigens present, and their low refractive index. We addressed these limitations for detection and characterization of EV by flow cytometry through the use of multiplex and multicolor in situ proximity ligation assays (in situ PLA), allowing each detected EV to be easily recorded over background noise using a conventional flow cytometer. By targeting sets of proteins on the surface that are specific for distinct classes of EVs, the method allows for selective recognition of populations of EVs in samples containing more than one type of EVs. The method presented herein opens up for analyses of EVs using flow cytometry for their characterization and quantification.
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影响因子：
2.4
作者：
Kamali-Moghaddam, Masood;Pettersson, Frida Ekholm;Landegren, Ulf
通讯作者：
Landegren, Ulf
DOI：
10.1073/pnas.1116848108
发表时间：
2011-12-20
影响因子：
11.1
作者：
Berda-Haddad, Yael;Robert, Stephane;Kaplanski, Gilles
通讯作者：
Kaplanski, Gilles
影响因子：
--
作者：
STEGMAYR, B;RONQUIST, G
通讯作者：
RONQUIST, G
DOI：
10.1073/pnas.1418401112
发表时间：
2015-03-24
影响因子：
11.1
作者：
Kanada, Masamitsu;Bachmann, Michael H.;Contag, Christopher H.
通讯作者：
Contag, Christopher H.
影响因子：
7
作者：
Leuchowius, Karl-Johan;Clausson, Carl-Magnus;Soderberg, Ola
通讯作者：
Soderberg, Ola