Tyrosinase-Mediated Synthesis of Nanobody-Cell Conjugates.
Tyrosinase-Mediated Synthesis of Nanobody-Cell Conjugates.
复制标题
酪氨酸酶介导的纳米型细胞结合物的合成。
DOI：
10.1021/acscentsci.1c01265
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发表时间：
2022-07-27
影响因子：
18.2
通讯作者：
Francis, Matthew B.
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Maza, Johnathan C.;Garcia-Almedina, Derek M.;Boike, Lydia E.;Hamlish, Noah X.;Nomura, Daniel K.;Francis, Matthew B.
报道了一种方便的用于细胞表面修饰的酶促策略。使用从双孢蘑菇中分离的酪氨酸酶，在纳米抗体的C-末端引入的独特酪氨酸残基可以被位点选择性氧化为反应性邻醌。这些反应性中间体经历细胞表面上存在的亲核硫醇、胺和咪唑残基的快速修饰，产生显示靶向抗原结合的新型纳米抗体-细胞缀合物。我们将这种方法扩展到用于靶向免疫治疗应用的纳米抗体-NK细胞缀合物的合成。所得NK细胞缀合物表现出靶向细胞结合并引起靶向细胞死亡。提出了一种新的方法，用于使用酪氨酸酶合成蛋白质-细胞缀合物，同时保留细胞活力和功能。
A convenient enzymatic strategy is reported for the modification of cell surfaces. Using a tyrosinase enzyme isolated from Agaricus bisporus, unique tyrosine residues introduced at the C-termini of nanobodies can be site-selectively oxidized to reactive o-quinones. These reactive intermediates undergo rapid modification with nucleophilic thiol, amine, and imidazole residues present on cell surfaces, producing novel nanobody–cell conjugates that display targeted antigen binding. We extend this approach toward the synthesis of nanobody–NK cell conjugates for targeted immunotherapy applications. The resulting NK cell conjugates exhibit targeted cell binding and elicit targeted cell death. A novel methodology is presented for using tyrosinase to synthesize protein−cell conjugates while retaining cell viability and function.
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