Effects of trichostatin A on neuronal mu-opioid receptor gene expression.
Effects of trichostatin A on neuronal mu-opioid receptor gene expression.
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DOI：
10.1016/j.brainres.2008.09.083
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发表时间：
2008-12-30
期刊：
影响因子：
2.9
通讯作者：
Ko JL
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Lin YC;Flock KE;Cook RJ;Hunkele AJ;Loh HH;Ko JL
在这项研究中，我们使用内源表达 MOR 的人神经元 NMB 细胞确定了组蛋白脱乙酰酶 (HDAC) 抑制剂曲古抑菌素 A (TSA) 对神经元 mu-阿片受体 (MOR) 基因表达的影响。通过 NMB 细胞染色质免疫沉淀 (ChIP) 分析，检测到两类 HDAC（HDAC1 和 HDAC2）原位招募到 MOR 启动子区域。使用荧光素酶报告基因系统的功能分析表明，与载体处理组相比，TSA 诱导启动子活性增加约 3 倍。突变分析表明，TSA 反应是由位于小鼠 MOR 近端核心启动子区域的 dsDNA（Sp1/Sp3 结合位点）和 ssDNA（PolyC 结合蛋白 1，PCBP，结合位点）元件介导的，进一步表明该顺式元件的功能重要性，它显示了人和小鼠 MOR 基因之间的高度序列同源性。 ChIP 分析进一步表明，TSA 增强了 Sp1/Sp3 和 PCBP 向启动子区域的募集，而使用蛋白质印迹分析未观察到总蛋白对 TSA 的显着变化。此外，共聚焦图像显示 TSA 诱导神经元细胞中内源性 PCBP 的核热点，而在媒介物处理的细胞中没有观察到明显的核 PCBP 热点。总而言之，这些结果表明 TSA 在转录水平上增强了神经元 MOR 基因的表达。 RT-PCR 分析进一步表明，TSA 还通过增强 MOR mRNA 的不稳定性，以时间依赖性方式降低 MOR mRNA 的稳态水平。因此，数据表明，表观遗传调节因子 TSA 在转录和转录后水平上影响神经元 MOR 基因的表达。
In this study, we determined the effects of a histone deacetylase (HDAC) inhibitor, trichostatin A (TSA), on neuronal mu-opioid receptor (MOR) gene expression using human neuronal NMB cells, endogenously expressing MOR. Recruitment of two classes of HDAC, HDAC1 and HDAC2, to MOR promoter region in situ was detected via chromatin immunoprecipitation (ChIP) analysis with NMB cells. Functional analysis using the luciferase reporter gene system showed that TSA induced an approximately 3-fold increase of the promoter activity as compared to the vehicle treated group. Mutation analysis demonstrated that TSA response was mediated by both dsDNA (Sp1/Sp3 binding site) and ssDNA (PolyC binding protein1, PCBP, binding site) elements located in mouse MOR proximal core promoter region, further suggesting the functional importance of this cis-element, which shows high sequence homology between human and mouse MOR genes. ChIP analysis further suggested that TSA enhanced the recruitment of Sp1/Sp3 and PCBP to the promoter region, whereas no significant changes of total proteins were observed in response to TSA using Western blot analysis. Moreover, confocal images showed TSA-induced nuclear hot spots of endogenous PCBP in neuronal cells, whereas no obvious nuclear PCBP hotspot was observed in vehicle treated cells. Taken together, these results suggested that TSA enhanced neuronal MOR gene expression at the transcriptional level. RT-PCR analysis further revealed that TSA also decreased the steady-state level of MOR mRNA in a time-dependent manner by enhancing its instability. Thus, data suggest that TSA, an epigenetic regulator, affects neuronal MOR gene expression at both transcriptional and post-transcriptional levels.
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DOI：
10.1083/jcb.149.2.271
发表时间：
2000-04-17
期刊：
The Journal of cell biology
影响因子：
--
作者：
Leonhardt H;Rahn HP;Weinzierl P;Sporbert A;Cremer T;Zink D;Cardoso MC
通讯作者：
Cardoso MC
DOI：
10.1016/s0169-328x(03)00086-x
发表时间：
2003-04-10
期刊：
MOLECULAR BRAIN RESEARCH
影响因子：
--
作者：
Ko, JL;Liu, HC;Loh, HH
通讯作者：
Loh, HH
DOI：
10.1016/s0169-328x(02)00357-1
发表时间：
2002-08-15
期刊：
MOLECULAR BRAIN RESEARCH
影响因子：
--
作者：
Ko, JL;Chen, HC;Loh, HH
通讯作者：
Loh, HH
影响因子：
9.7
作者：
Januchowski, Radoslaw;Dabrowski, Mikolaj;Jagodzinski, Pawel P.
通讯作者：
Jagodzinski, Pawel P.
影响因子：
3.6
作者：
Kim, SS;Pandey, KK;Loh, HH
通讯作者：
Loh, HH