Two chemical-controlled switchable Cas9s for tunable gene editing
Two chemical-controlled switchable Cas9s for tunable gene editing
复制标题
两个化学控制的可切换 Cas9，用于可调基因编辑
DOI：
10.1007/s41048-019-0093-3
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发表时间：
2019-06
期刊：
影响因子：
--
通讯作者：
Jizhong Lou
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Meng Liang;Yang Cui;Jie Lan;Guangtao Song;Jizhong Lou
在许多细菌和古细菌基因组中发现成簇的规则间隔短回文重复序列（CRISPR）基因座及其相关（Cas）基因，作为针对噬菌体感染和质粒转移的适应性防御系统（Mohanraju et al. 2016）。在CRISPR-Cas系统中，单个或多个Cas蛋白与小CRISPR RNA（crRNA）复合，形成RNA蛋白复合物（RNP），其使用crRNA作为破坏入侵核酸的指导（Mohanraju等人，2016）。基于CRISPR基因座组织和Cas基因含量，CRISPR-Cas系统分为两类。1类系统使用称为Cascade的几种Cas蛋白的复合物，而2类系统使用单一Cas蛋白（如Cas9）作为干扰模块来识别和切割靶核酸（Mohanraju et al. 2016）。2013年，来自化脓性链球菌的2类CRISPR-Cas系统CRISPR-Cas9被重新用作精确基因编辑和基因表达控制的革命性工具（Cong et al. 2013）。在该系统中，酿脓链球菌Cas9（SpyCas 9）首先结合包含crRNA和反式激活crRNA（tracrRNA）模块的人工嵌合单向导RNA（sgRNA）以形成效应子复合物（Cas9-sgRNA复合物）（Jinek等人，2012）。在靶DNA中识别短的前间隔子邻近基序（PAM）序列后，Cas9-sgRNA复合物结合靶DNA中的R环并诱导R环。
The clustered regularly interspaced short palindromic repeats (CRISPR) loci and their associated (Cas) genes are found in many bacterial and archaeal genomes as adaptive defense systems against phage infection and plasmid transfer (Mohanraju et al. 2016). In the CRISPR-Cas system, single or multiple Cas proteins were complexed with a small CRISPR RNA (crRNA), forming an RNA protein complex (RNP), which uses the crRNA as the guide to destruct the invading nucleic acids (Mohanraju et al. 2016). Based on CRISPR locus organization and the Cas gene content, CRISPR-Cas systems are divided into two classes. Class 1 systems use a complex of several Cas proteins called Cascade, while class 2 systems use a single Cas protein (such as Cas9), as interference module to recognize and cleave the target nucleic acids (Mohanraju et al. 2016). In 2013, a class 2 CRISPR-Cas system, CRISPR-Cas9, from Streptococcus pyogenes, was repurposed as a revolutionary tool for precise gene editing and gene expression control (Cong et al. 2013). In this system, the Streptococcus pyogenes Cas9 (SpyCas9) first binds to an artificial chimeric single-guide RNA (sgRNA) comprising crRNA and a transactivating crRNA (tracrRNA) module to form an effector complex (Cas9–sgRNA complex)(Jinek et al. 2012). After the recognition of a short protospaceradjacent motif (PAM) sequence in target DNA, Cas9–sgRNA complex binds and induces an R-loop in target
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