Orthogonal Cas9-Cas9 chimeras provide a versatile platform for genome editing.
Orthogonal Cas9-Cas9 chimeras provide a versatile platform for genome editing.
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DOI：
10.1038/s41467-018-07310-x
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发表时间：
2018-11-19
影响因子：
16.6
通讯作者：
Wolfe SA
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Bolukbasi MF;Liu P;Luk K;Kwok SF;Gupta A;Amrani N;Sontheimer EJ;Zhu LJ;Wolfe SA
开发强大、通用和准确的工具集对于促进治疗性基因组编辑应用至关重要。在这里，我们以单核酸酶和双核酸酶形式建立RNA可编程Cas9-Cas9嵌合体，作为通用基因组工程系统。在这两种形式中，Cas9-Cas9融合体显示出扩展的靶向库并实现高度特异性的基因组编辑。双核酸酶Cas9-Cas9嵌合体相对于单体Cas9具有明显的优势，包括更高的靶位点活性和在其靶位点之间产生可预测的精确缺失产物。在BCL 11 A红细胞增强子内的治疗相关位点，Cas9-Cas9核酸酶产生精确缺失，其包含高达97%的所有序列改变。因此，Cas9-Cas9嵌合体代表了一种重要的工具，其对于治疗性基因组编辑应用可能特别有价值，其中精确的切割位置和限定的序列终产物是期望的。治疗性基因组工程依赖于可靠、强大和通用工具的开发。在这里，作者开发了具有高靶位点活性的Cas9-Cas9嵌合体，其产生可预测的缺失。
The development of robust, versatile and accurate toolsets is critical to facilitate therapeutic genome editing applications. Here we establish RNA-programmable Cas9-Cas9 chimeras, in single- and dual-nuclease formats, as versatile genome engineering systems. In both of these formats, Cas9-Cas9 fusions display an expanded targeting repertoire and achieve highly specific genome editing. Dual-nuclease Cas9-Cas9 chimeras have distinct advantages over monomeric Cas9s including higher target site activity and the generation of predictable precise deletion products between their target sites. At a therapeutically relevant site within the BCL11A erythroid enhancer, Cas9-Cas9 nucleases produced precise deletions that comprised up to 97% of all sequence alterations. Thus Cas9-Cas9 chimeras represent an important tool that could be particularly valuable for therapeutic genome editing applications where a precise cleavage position and defined sequence end products are desirable. Therapeutic genome engineering relies on the development of reliable, robust and versatile tools. Here the authors develop Cas9-Cas9 chimeras with high target site activity that generate predictable deletions.
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影响因子：
7
作者：
Cho SW;Kim S;Kim Y;Kweon J;Kim HS;Bae S;Kim JS
通讯作者：
Kim JS
影响因子：
64.8
作者：
Anders, Carolin;Niewoehner, Ole;Duerst, Alessia;Jinek, Martin
通讯作者：
Jinek, Martin
影响因子：
56.9
作者：
Jinek, Martin;Chylinski, Krzysztof;Charpentier, Emmanuelle
通讯作者：
Charpentier, Emmanuelle
DOI：
10.1111/j.2517-6161.1995.tb02031.x
发表时间：
1995-01-01
影响因子：
5.8
作者：
BENJAMINI, Y;HOCHBERG, Y
通讯作者：
HOCHBERG, Y
影响因子：
46.9
作者：
通讯作者：
--