Terpolymeric platform with enhanced hydrophilicity via cysteic acid for serum intact glycopeptide analysis.
Terpolymeric platform with enhanced hydrophilicity via cysteic acid for serum intact glycopeptide analysis.
复制标题
DOI：
10.1007/s00604-022-05343-0
复制
发表时间：
2022-07-13
影响因子：
5.7
通讯作者：
Ressom, Habtom W.
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Sajid, Muhammad Salman;Saleem, Shafaq;Jabeen, Fahmida;Najam-ul-Haq, Muhammad;Ressom, Habtom W.
一种新的聚合物（甲基丙烯酸甲酯/乙二醇二甲基丙烯酸酯/1,2 - 环氧 - 5 - 己烯）基底/基质已被制备出来，并使用两性离子亲水性半胱氨酸（Cya）进行修饰，用于从标准品和生物样品中富集完整的N - 糖肽。三元共聚物 - Cya凭借三元共聚物提供的更大表面积（2.09×10² m²/g）以及半胱氨酸提供的两性离子特性，具有良好的富集效率、改善的亲水性和选择性。半胱氨酸酸功能化的聚合物亲水相互作用液相色谱（HILIC）吸附剂通过固相萃取（SPE）模式从模型糖蛋白（即免疫球蛋白G（IgG）和辣根过氧化物酶（HRP））的胰蛋白酶消化物中分别富集了35种和24种N - 连接糖肽。半胱氨酸的两性离子化学性质有助于在牛血清白蛋白消化物（1 : 200）中实现更高的选择性，并且对每种标准消化物的完整糖基化谱可达到低至100阿托摩尔的检测限。81%的回收率和良好的重现性确定了三元共聚物 - Cya在血清等复杂样品中的应用。对人血清的分析通过纳流液相色谱 - 串联质谱（nLC - MS/MS）提供了807种完整N - 连接糖肽的谱图。据我们所知，这是任何HILIC吸附剂所富集的糖肽数量最多的一次。使用单核苷酸变异（BioMuta）对选定的糖蛋白与包括乳腺癌、肺癌、子宫癌和黑色素瘤在内的各种癌症的关联进行了评估。这项研究体现了将一种内部开发的策略作为一种成功的工具来帮助分析、关联和解答有关癌症的基于糖蛋白的临床问题的完整思路。
A new polymeric (methyl methacrylate/ethylene glycol dimethacrylate/1,2-epoxy-5-hexene) base/matrix has been fabricated and decorated with zwitterionic hydrophilic cysteic acid (Cya) for the enrichment of intact N-glycopeptides from standards and biological samples. Terpolymer-Cya provides good enrichment efficiency, improved hydrophilicity, and selectivity by virtue of better surface area (2.09 × 102 m2/g) provided by terpolymer and the zwitterionic property offered by cysteic acid. Cysteic acid-functionalized polymeric hydrophilic interaction liquid chromatography (HILIC) sorbent enriches 35 and 24 N-linked glycopeptides via SPE (solid phase extraction) mode from tryptic digests of model glycoproteins, i.e., immunoglobulin G (IgG) and horseradish peroxidase (HRP), respectively. Zwitterionic chemistry of cysteine helps in achieving higher selectivity with BSA digest (1:200), and lower detection limit down to 100 attomoles with a complete glycosylation profile of each standard digest. The recovery of 81% and good reproducibility define the application of terpolymer-Cya for complex samples like a serum. Analysis of human serum provides a profile of 807 intact N-linked glycopeptides via nanoliquid chromatography-tandem mass spectrometry (nLC-MS/MS). To the best of our knowledge, this is the highest number of glycopeptides enriched by any HILIC sorbent. Selected glycoproteins are evaluated in link to various cancers including the breast, lung, uterine, and melanoma using single-nucleotide variances (BioMuta). This study represents the complete idea of using an in-house developed strategy as a successful tool to help analyze, relate, and answer glycoprotein-based clinical issues regarding cancers.
登录
查看更多内容
影响因子：
82.9
作者：
通讯作者：
--
用于高度特异性富集 N-糖肽的酰肼功能化核壳磁性纳米复合材料
影响因子：
9.5
作者：
Liu, Liting;Yu, Meng;Lu, Haojie
通讯作者：
Lu, Haojie
影响因子：
2
作者：
Krokhin, O;Ens, W;Perreault, H
通讯作者：
Perreault, H
带有聚合物刷的麦芽糖功能化亲水性磁性纳米粒子用于高选择性富集 N-连接糖肽
影响因子：
4.1
作者：
Bi C;Liang Y;Shen L;Tian S;Zhang K;Li Y;He X;Chen L;Zhang Y
通讯作者：
Zhang Y
影响因子：
4.3
作者：
Boersema, Paul J.;Mohammed, Shabaz;Heck, Albert J. R.
通讯作者：
Heck, Albert J. R.