Expanding the genetic code of Escherichia coli with phosphoserine.
Expanding the genetic code of Escherichia coli with phosphoserine.
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DOI：
10.1126/science.1207203
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发表时间：
2011-08-26
期刊：
影响因子：
--
通讯作者：
Söll D
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Park HS;Hohn MJ;Umehara T;Guo LT;Osborne EM;Benner J;Noren CJ;Rinehart J;Söll D
O -磷酸丝氨酸（Sep）是真核生物磷酸化蛋白质组中含量最丰富的磷酸化氨基酸，它不是由遗传密码编码，而是后天合成的。在这里，我们提出了一个工程系统的特定的共翻译Sep掺入（UAG指导）到蛋白质中的任何所需的位置，由大肠杆菌菌株，窝藏一个Sep接受转移RNA（tRNASep），其同源Sep-tRNA合成酶（SepRS），和工程EF-Tu（EF-Sep）。扩展遗传密码依赖于重新设计EF-Tu以放松其质量控制功能并允许Sep-tRNASep结合。为了测试我们的系统，我们合成了人促分裂原活化的ERK活化激酶1（MEK 1）的活化形式，其中一个或两个Sep残基互补地插入其典型位置（Sep 218，Sep 222）。该系统在蛋白质工程、分子生物学和疾病研究中具有普遍的实用性。
O -Phosphoserine (Sep), the most abundant phosphoamino acid in the eukaryotic phosphoproteome, is not encoded in the genetic code, but synthesized posttranslationally. Here, we present an engineered system for specific cotranslational Sep incorporation (directed by UAG) into any desired position in a protein by an Escherichia coli strain that harbors a Sep-accepting transfer RNA (tRNASep), its cognate Sep–tRNA synthetase (SepRS), and an engineered EF-Tu (EF-Sep). Expanding the genetic code rested on reengineering EF-Tu to relax its quality-control function and permit Sep-tRNASep binding. To test our system, we synthesized the activated form of human mitogen-activated ERK activating kinase 1 (MEK1) with either one or two Sep residues cotranslationally inserted in their canonical positions (Sep218, Sep222). This system has general utility in protein engineering, molecular biology, and disease research.
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时空信号传导：蛋白质聚集在一起以及它们分开的位置。
DOI：
10.1126/science.1175668
发表时间：
2009-11-27
期刊：
Science (New York, N.Y.)
影响因子：
--
作者：
Scott JD;Pawson T
通讯作者：
Pawson T
DOI：
10.1073/pnas.1102128108
发表时间：
2011-03-29
影响因子：
11.1
作者：
Schrader, Jared M.;Chapman, Stephen J.;Uhlenbeck, Olke C.
通讯作者：
Uhlenbeck, Olke C.
影响因子：
15
作者：
Rothman, DM;Petersson, EJ;Imperiali, B
通讯作者：
Imperiali, B
影响因子：
64.8
作者：
Nozawa, Kayo;O'Donoghue, Patrick;Gundllapalli, Sarath;Araiso, Yuhei;Ishitani, Ryuichiro;Umehara, Takuya;Soell, Dieter;Nureki, Osamu
通讯作者：
Nureki, Osamu
影响因子：
56.9
作者：
LaRiviere, FJ;Wolfson, AD;Uhlenbeck, OC
通讯作者：
Uhlenbeck, OC