Analysis of the F-actin binding fragments of vinculin using stopped-flow and dynamic light-scattering measurements.
Analysis of the F-actin binding fragments of vinculin using stopped-flow and dynamic light-scattering measurements.
复制标题
使用停流和动态光散射测量分析纽蛋白的 F-肌动蛋白结合片段。
DOI：
--
复制
发表时间：
1998
期刊：
影响因子：
--
通讯作者：
R. Ezzell
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
W. H. Goldmann;Z. Guttenberg;J. X. Tang;K. Kroy;G. Isenberg;R. Ezzell
利用从鸡黏着斑蛋白表达的氨基酸884-1066和884-1012作为与溶酶体谷胱甘肽S-转移酶的融合蛋白，我们测定了蛋白片段与F-肌动蛋白的结合动力学。我们通过停流法建立了两步结合过程：初始快速反应，然后是较慢的过程。后者归因于F-肌动蛋白交联和/或成束，其先前通过粘度计和电子显微镜检测到[约翰逊，R. P. &克雷格，S. W.等（1995）Nature 373，261-264]。动态光散射测量也支持这一点，表明内部肌动蛋白丝动力学发生了巨大变化，即由于热噪声引起的弯曲波动。两种融合蛋白与F-肌动蛋白的结合反应的相似大小表明黏着斑蛋白上的F-肌动蛋白结合位点位于残基884-1012之间。两种方法均未检测到纯谷胱甘肽S-转移酶或其与黏着斑蛋白肽1012-1066的融合蛋白与F-肌动蛋白的结合。
Using amino acids 884-1066 and 884-1012 expressed from chicken vinculin as fusion proteins with schistosomal glutathione S-transferase, we determined the binding kinetics of the protein fragments with F-actin. We established by the stopped-flow method a two-step binding process: an initial rapid reaction followed by a slower process. The latter is attributed to F-actin cross-linking and/or bundling, which was previously detected by viscometry and electron microscopy [Johnson, R. P. & Craig, S. W. (1995) Nature 373, 261-264]. This is also supported by dynamic light-scattering measurements, indicating dramatic changes in the internal actin filament dynamics, i.e. in bending undulations due to thermal noise. The similar size of the binding reaction for both fusion proteins with F-actin indicates that the F-actin binding site(s) on vinculin are located between residues 884-1012. No binding of pure glutathione S-transferase or its fusion protein with vinculin peptide 1012-1066 with F-actin was detected by either method.
登录
查看更多内容
影响因子：
2.9
作者：
Tang, JX;Ito, T;Janmey, PA
通讯作者：
Janmey, PA
平滑肌钙调蛋白对肌动蛋白组装的静电作用。
DOI：
10.1111/j.1432-1033.1997.00432.x
发表时间：
1997
期刊：
European journal of biochemistry
影响因子：
--
作者：
Tang,JX;Szymanski,PT;Janmey,PA;Tao,T
通讯作者：
Tao,T
纽蛋白头部和尾部结构域之间的分子内关联调节踝蛋白结合。
DOI：
--
发表时间：
1994
期刊：
The Journal of biological chemistry
影响因子：
--
作者：
Johnson,RP;Craig,SW
通讯作者：
Craig,SW
纽蛋白中桩蛋白结合位点和 C 端粘着斑靶向序列的表征。
影响因子：
4
作者：
Wood,CK;Turner,CE;Jackson,P;Critchley,DR
通讯作者：
Critchley,DR