Repurposing a photosynthetic antenna protein as a super-resolution microscopy label.
Repurposing a photosynthetic antenna protein as a super-resolution microscopy label.
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DOI：
10.1038/s41598-017-16834-z
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发表时间：
2017-12-01
影响因子：
4.6
通讯作者：
Hunter CN
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Barnett SFH;Hitchcock A;Mandal AK;Vasilev C;Yuen JM;Morby J;Brindley AA;Niedzwiedzki DM;Bryant DA;Cadby AJ;Holten D;Hunter CN
随机光学重建显微镜（STORM）和结构照明显微镜（SIM）等技术提高了光学成像的分辨率，但很少有荧光蛋白适合超分辨率显微镜，特别是在远红和近红外发射范围内。在这里，我们展示了 CpcA（蓝藻光合天线复合体的一个亚基）对于 STORM 和 SIM 成像的适用性。具有共价连接的藻红素 (PEB) 或藻蓝素 (PCB) 生色团的 CpcA 纳米阵列的周期性和宽度与重建的 STORM 图像中的线条相匹配。对细胞质膜中含有 CpcA 标记的细胞色素 bd 1 泛醇氧化酶的大肠杆菌细胞进行 SIM 和 STORM 重建，表明 CpcA-PEB 和 CpcA-PCB 适用于体内超分辨率成像。 CpcA-PEB 和 CpcA-PCB 的稳定性、易于生产、小尺寸和亮度证明了这一很大程度上未经探索的蛋白质家族作为超分辨率显微镜新型探针的潜力。
Techniques such as Stochastic Optical Reconstruction Microscopy (STORM) and Structured Illumination Microscopy (SIM) have increased the achievable resolution of optical imaging, but few fluorescent proteins are suitable for super-resolution microscopy, particularly in the far-red and near-infrared emission range. Here we demonstrate the applicability of CpcA, a subunit of the photosynthetic antenna complex in cyanobacteria, for STORM and SIM imaging. The periodicity and width of fabricated nanoarrays of CpcA, with a covalently attached phycoerythrobilin (PEB) or phycocyanobilin (PCB) chromophore, matched the lines in reconstructed STORM images. SIM and STORM reconstructions of Escherichia coli cells harbouring CpcA-labelled cytochrome bd 1 ubiquinol oxidase in the cytoplasmic membrane show that CpcA-PEB and CpcA-PCB are suitable for super-resolution imaging in vivo. The stability, ease of production, small size and brightness of CpcA-PEB and CpcA-PCB demonstrate the potential of this largely unexplored protein family as novel probes for super-resolution microscopy.
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DOI：
10.1073/pnas.94.20.10919
发表时间：
1997-09-30
影响因子：
11.1
作者：
Poss, KD;Tonegawa, S
通讯作者：
Tonegawa, S
影响因子：
2.9
作者：
Kremers, Gert-Jan;Goedhart, Joachim;Gadella, Theodorus W. J., Jr.
通讯作者：
Gadella, Theodorus W. J., Jr.
影响因子：
3.4
作者：
Gunewardene, Mudalige S.;Subach, Fedor V.;Hess, Samuel T.
通讯作者：
Hess, Samuel T.
影响因子：
4.3
作者：
Li, Yaqiong;Lin, Yuankui;Chen, Min
通讯作者：
Chen, Min
影响因子：
2.9
作者：
Alvey, Richard M.;Biswas, Avijit;Bryant, Donald A.
通讯作者：
Bryant, Donald A.