Single-Cell Characterization of Viral Translation-Competent Reservoirs in HIV-Infected Individuals.
Single-Cell Characterization of Viral Translation-Competent Reservoirs in HIV-Infected Individuals.
复制标题
DOI：
10.1016/j.chom.2016.07.015
复制
发表时间：
2016-09-14
影响因子：
30.3
通讯作者：
Kaufmann DE
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Baxter AE;Niessl J;Fromentin R;Richard J;Porichis F;Charlebois R;Massanella M;Brassard N;Alsahafi N;Delgado GG;Routy JP;Walker BD;Finzi A;Chomont N;Kaufmann DE
HIV 治疗工作因支持 HIV 体内复制的细胞特征有限以及量化接受抗逆转录病毒治疗的患者中潜伏病毒库的方法不足而受到阻碍。我们将荧光原位 RNA 杂交与 HIV 蛋白检测和流式细胞术相结合，能够检测每百万个 0.5-1 个 gag-pol mRNA+/Gag 蛋白+感染细胞。在未经治疗的人的外周血中，活跃的 HIV 复制与病毒血症相关，并且发生在表达 T 滤泡辅助细胞标记物和抑制性共受体的 CD4 T 细胞中。在病毒抑制的受试者中，该方法鉴定出在用 PMA/离子霉素和潜伏期逆转剂 (LRA) 刺激后能够产生 HIV mRNA 和蛋白质的潜伏感染细胞。虽然巨大戟二萜醇诱导的再激活反映了效应器和中央/过渡记忆 CD4 T 细胞对整合的 HIV DNA 池的贡献，但苔藓抑素诱导的再激活主要发生在表达效应器记忆标记的细胞中。这表明 CD4 T 细胞分化状态对 LRA 有效性的影响存在差异。技术限制阻碍了支持持续 HIV 感染的 CD4 T 细胞的表征和潜在储存库的量化。巴克斯特等人。使用同时检测病毒蛋白和 mRNA 来量化和表型病毒血症期间持续的感染以及病毒抑制的治疗患者中具有翻译能力的诱导型病毒库。
HIV cure efforts are hampered by limited characterization of the cells supporting HIV replication in vivo and inadequate methods for quantifying the latent viral reservoir in patients receiving antiretroviral therapy. We combine fluorescent in situ RNA hybridization with detection of HIV protein and flow cytometry, enabling detection of 0.5–1 gag-pol mRNA+/Gag protein+ infected cells per million. In the peripheral blood of untreated persons, active HIV replication correlated with viremia, and occurred in CD4 T cells expressing T follicular helper cell markers and inhibitory co-receptors. In virally-suppressed subjects, the approach identified latently infected cells capable of producing HIV mRNA and protein after stimulation with PMA/ionomycin and latency-reversing agents (LRAs). While ingenol-induced reactivation mirrored the effector and central/transitional memory CD4 T cell contribution to the pool of integrated HIV DNA, bryostatin-induced reactivation occurred predominantly in cells expressing effector memory markers. This indicates that CD4 T cell differentiation status differentially affects LRA effectiveness. Technological limitations hamper characterization of CD4 T cells supporting ongoing HIV infection and quantification of the latent reservoir. Baxter, et al. use simultaneous detection of viral protein and mRNA to quantify and phenotype both the ongoing infection during viremia and the translation-competent inducible reservoir in virally-supressed, treated patients.
登录
查看更多内容
DOI：
10.1097/qad.0000000000000289
发表时间：
2014-07-17
期刊：
AIDS (London, England)
影响因子：
--
作者：
Jiang G;Mendes EA;Kaiser P;Sankaran-Walters S;Tang Y;Weber MG;Melcher GP;Thompson GR 3rd;Tanuri A;Pianowski LF;Wong JK;Dandekar S
通讯作者：
Dandekar S
影响因子：
16.6
作者：
Hurst J;Hoffmann M;Pace M;Williams JP;Thornhill J;Hamlyn E;Meyerowitz J;Willberg C;Koelsch KK;Robinson N;Brown H;Fisher M;Kinloch S;Cooper DA;Schechter M;Tambussi G;Fidler S;Babiker A;Weber J;Kelleher AD;Phillips RE;Frater J
通讯作者：
Frater J
DOI：
10.1084/jem.20121932
发表时间：
2013-01-14
期刊：
The Journal of experimental medicine
影响因子：
--
作者：
Perreau M;Savoye AL;De Crignis E;Corpataux JM;Cubas R;Haddad EK;De Leval L;Graziosi C;Pantaleo G
通讯作者：
Pantaleo G
影响因子：
64.5
作者：
Ho YC;Shan L;Hosmane NN;Wang J;Laskey SB;Rosenbloom DI;Lai J;Blankson JN;Siliciano JD;Siliciano RF
通讯作者：
Siliciano RF
影响因子：
21.8
作者：
通讯作者：
--