Activation of phospholipase D by chemotactic peptide in HL-60 granulocytes.

Activation of phospholipase D by chemotactic peptide in HL-60 granulocytes.
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HL-60 粒细胞中趋化肽激活磷脂酶 D。

DOI:
10.1016/0006-291x(88)90528-1
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发表时间:
1988
影响因子:
3.1
通讯作者:
M. Billah
M. Billah
中科院分区:
生物学4区
文献类型:
--
作者:
J. Pai;M. Siegel;R. Egan;M. Billah

文献摘要

参考文献

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通过与 [3 H] 烷基-lysoPC 一起孵育,在内源性 1-0-烷基-2-酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱 (烷基-PC) 中标记的二甲亚砜分化的 HL-60 粒细胞中研究了磷脂酶 D (PLD) 的激活。用趋化肽 N-甲酰基-Met-Leu-Phe (fMLP) 刺激这些标记细胞,诱导 [3 H] 磷脂酸 (PA) 的快速生成和 [3 H] 甘油二酯的较慢形成,表明 PLD 会水解烷基-PC。 PLD 的一个独特功能是能够将磷脂的磷脂酰部分转移至醇(转磷脂酰化)。该特性已被用来识别 PLD 活性。例如,当刺激 HL-60 细胞期间存在乙醇时,会形成 [3 H] 磷脂酰乙醇 (PEt),同时 [3 H] PA 也会减少。与[32 聚磷酸盐] 一起孵育以标记ATP 末端磷酸盐的细胞不会将 32 P 掺入PEt 中,这与[3 H] PEt 不是由[3 H] 甘油二酯合成的情况一致。相比之下,[3H]PA 由 PLD 和甘油二酯激酶活性产生。此外,PEt 合成与 PA 形成密切相关,并且两者均受到 fMLP 受体拮抗剂的抑制,这表明 PA 和 PEt 均源自激动剂刺激的 PLD 作用。这些观察结果与 fMLP 刺激的粒细胞中磷脂酶 D 催化的烷基 PC 分解一致。
Activation of phospholipase D (PLD) has been investigated in dimethylsulfoxide differentiated HL-60 granulocytes labeled in endogenous 1-0-alkyl-2-acyl-sn-glycero-3-phosphocholine (alkyl-PC) by incubation with [3 H] alkyl-lysoPC. Stimulation of these labeled cells with the chemotactic peptide, N-formyl-Met-Leu-Phe (fMLP), induces rapid generation of [3 H] phosphatidic acid (PA) and slower formation of [3 H] diglyceride, suggesting hydrolysis of alkyl-PC by PLD. A unique feature of PLD is its ability to transfer the phosphatidyl moiety of phospholipids to alcohols (transphosphatidylation). This characteristic has been exploited to identify PLD activity. For example, when ethanol is present during stimulation of the HL-60 cells,[3 H] phosphatidylethanol (PEt) is formed with a concomitant decrease in [3 H] PA. Cells incubated with [32 Plorthophosphate to label the terminal phosphate of ATP do not incorporate 32 P into PEt, consistent with the [3 H] PEt not being synthesized from [3 H] diglyceride. In contrast,[3 H] PA arises from both PLD and diglyceride kinase activities. Furthermore, PEt synthesis closely parallels PA formation and both are inhibited by an fMLP receptor antagonist, suggesting that both PA and PEt are derived from agonist-stimulated PLD action. These observations are consistent with phospholipase D-catalyzed breakdown of alkyl-PC in fMLP-stimulated granulocytes.
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DOI: --
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影响因子: --
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影响因子: --
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