Adapted HCV JFH1 variant is capable of accommodating a large foreign gene insert and allows lower level HCV replication and viral production.
Adapted HCV JFH1 variant is capable of accommodating a large foreign gene insert and allows lower level HCV replication and viral production.
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适应的HCV JFH1变体能够适应大型外国基因插入物，并允许较低水平的HCV复制和病毒产生。
DOI：
10.7150/ijbs.27411
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发表时间：
2018
影响因子：
9.2
通讯作者：
Liu S
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Wang Q;Hagedorn C;Liu S
携带报告基因的感染性HCV在理解HCV生命周期包括复制、病毒组装和释放方面具有进一步的应用。本研究将全长3039 bp的LacZ基因插入到JFH 1-AM 120的衍生物中，以开发另一种报告病毒。结果表明，重组报告病毒JFH 1-AM 120-LacZ能够复制并产生较低滴度的感染性病毒。然而，在HCV JFH 1-AM 120-LacZ中NS 5A的C-末端区域中插入LacZ基因降低了病毒复制并显著损害了感染性病毒颗粒的产生。此外，JFH 1-AM 120-LacZ报告病毒在连续传代后丢失了LacZ基因。然而，JFH 1-AM 120-LacZ报告病毒在Huh 7.5细胞中展示了HCV的整个生命周期，从复制到产生感染性病毒。本研究表明，HCV JFH 1-AM 120的NS 5A区域具有容纳高达3，039 bp的大外源基因的能力，并表明其他相对较大的基因插入物可以容纳在该位点。
Infectious HCV carrying reporter genes have further applications in understanding the HCV life cycle including replication, viral assembly and release. In this study, a full-length 3039bp LacZ gene was inserted into the derivative of JFH1-AM120 to develop an additional reporter virus. The results showed that the recombinant reporter virus JFH1-AM120-LacZ can replicate and produce lower titers of infectious virus. However, insertion of the LacZ gene in the C-terminal region of the NS5A in HCV JFH1-AM120-LacZ decreased viral replication and dramatically impaired the production of infectious viral particles. Moreover, the JFH1-AM120-LacZ reporter virus lost the LacZ gene after serial passage. Nevertheless, the JFH1-AM120-LacZ reporter virus displayed the entire life cycle of HCV, from replication to production of infectious virus, in Huh7.5 cells. This study demonstrates that the NS5A region of HCV JFH1-AM120 has the capacity to accommodate large foreign genes up to 3,039 bp and suggests that other relatively large gene inserts can be accommodated at this site.
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