One for all--a highly efficient and versatile method for fluorescent immunostaining in fish embryos.
One for all--a highly efficient and versatile method for fluorescent immunostaining in fish embryos.
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所有人都是一种高效且通用的方法，用于鱼类胚胎中的荧光免疫染色。
DOI：
10.1371/journal.pone.0019713
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发表时间：
2011
期刊：
影响因子：
3.7
通讯作者：
Wittbrodt J
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Inoue D;Wittbrodt J
对于组织或生物体中蛋白质的检测和亚细胞（共）定位，整装制剂或切片中的免疫染色仍然是最好的方法。到目前为止，每种抗体都需要自己的固定和抗原修复方案，因此优化免疫染色既繁琐又耗时。在这里，我们提出了一种在广泛适用的标准方案中有效检索抗原的新方法，促进斑马鱼（Danio rerio）和青鳉（Oryzias latipes）的冷冻切片和整体制备物的荧光免疫染色。我们的方法克服了切片的丢失以及组织和细胞形态的损伤，并允许多种颜色的平行免疫染色、与转基因鱼系中的荧光蛋白的联合免疫染色以及与整体原位杂交相结合。
For the detection and sub-cellular (co)-localization of proteins in the context of the tissue or organism immunostaining in whole mount preparations or on sections is still the best approach. So far, each antibody required its own fixation and antigen retrieval protocol so that optimizing immunostaining turned out to be tedious and time consuming. Here we present a novel method to efficiently retrieve the antigen in a widely applicable standard protocol, facilitating fluorescent immunostaining of both cryosections and whole mount preparations in zebrafish (Danio rerio) and medaka (Oryzias latipes). Our method overcomes the loss of sections and damage of tissue and cell morphology, and allows parallel immunostaining in multiple colors, co-immunostaining with fluorescent proteins in transgenic fish lines and in combination with whole mount in situ hybridization.
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作者：
Shi, Shan-Rong;Liu, Cheng;Taylor, Clive R.
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Taylor, Clive R.
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Wittbrodt, Joachim
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