High temporal resolution fluorescence measurements of a mitochondrial dye for detection of early stage apoptosis.
High temporal resolution fluorescence measurements of a mitochondrial dye for detection of early stage apoptosis.
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DOI：
10.1039/c3an01142a
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发表时间：
2013-09-07
期刊：
影响因子：
--
通讯作者：
Pappas D
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Iyer D;Ray RD;Pappas D
在本研究中，早期细胞凋亡是探索与高时间分辨率。除了通过超灵敏的共聚焦荧光显微镜（UCFM）监测单个细胞中的早期凋亡诱导外，还探索了线粒体蛋白释放动力学。目前的研究表明，开发和优化了一种新的，快速的细胞凋亡测定，以探索细胞的内在凋亡途径的最早变化。我们发现，线粒体中的早期凋亡变化开始几乎同时添加一种凋亡诱导药物，如星形孢菌素。这种非侵入性分析技术的时间分辨率为5分钟，可以阐明活细胞中最早的凋亡事件。此外，我们的研究结果表明，线粒体膜间蛋白不参与由抗CD95抗体介导的拉莫斯细胞的外源性途径。其他技术，如光学显微镜和流式细胞术，以确认通过超灵敏的共聚焦荧光显微镜获得的结果。这项研究的结果有助于了解细胞凋亡诱导的最早机制，使药物测试和剂量反应分析的新方法成为可能。
In the present study, early stage apoptosis is explored with high temporal resolution. In addition to monitoring early apoptosis induction in single cells by ultrasensitive confocal fluorescence microscopy (UCFM), the mitochondrial proteins release kinetics was explored. The current study shows development and optimization of a novel, rapid apoptosis assay to explore the earliest changes in cells by the intrinsic apoptosis pathway. We show that early apoptotic changes in the mitochondria begin nearly simultaneously with the addition of an apoptosis-inducing drug, such as staurosporine. With a temporal resolution of five minutes, this non-invasive analytical technique can elucidate the earliest apoptotic events in living cells. Moreover, our results show that the mitochondrial inter-membrane proteins are not involved in the extrinsic pathway of Ramos cells mediated by an anti-CD95 antibody. Additional techniques such as light microscopy and flow cytometry were employed to confirm the results obtained by ultrasensitive confocal fluorescence microscopy. The results of this study help to understand the earliest mechanisms of apoptosis induction in cells, enabling new methods of drug testing and dose-response analyses.
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影响因子：
13.1
作者：
Pappas, Dimitri;Burrows, Sean M.;Reif, Randall D.
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Reif, Randall D.
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发表时间：
1990-12-12
期刊：
EUROPEAN JOURNAL OF BIOCHEMISTRY
影响因子：
--
作者：
PETIT, PX;OCONNOR, JE;BROWN, SC
通讯作者：
BROWN, SC