Analysis of the disulfide bond arrangement of the HIV-1 envelope protein CON-S gp140 ΔCFI shows variability in the V1 and V2 regions.
Analysis of the disulfide bond arrangement of the HIV-1 envelope protein CON-S gp140 ΔCFI shows variability in the V1 and V2 regions.
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DOI：
10.1021/pr100764a
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发表时间：
2011-02-04
影响因子：
4.4
通讯作者：
Desaire, Heather
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Go, Eden P.;Zhang, Ying;Menon, Sushma;Desaire, Heather
半胱氨酸的二硫键是最重要的蛋白质修饰之一，并且其在以生物活性形式建立/维持蛋白质结构中起关键作用。因此，确定二硫键排列是理解蛋白质化学结构和确定其功能结构域的一个重要方面。在本文中，为了了解HIV-1包膜蛋白的结构如何影响其免疫原性，我们使用基于MS的方法，液相色谱电喷雾电离傅立叶变换离子回旋共振（LC/ESI-FTICR）质谱法，以确定M组共有HIV-1包膜蛋白（Env）的寡聚体形式CON-S gp 140 ΔCFI上的二硫键。与单体gp 120和野生型gp 140 Envs相比，该蛋白质的免疫原性显著改善。我们的研究结果表明，CON-S gp 140 ΔCFI的N-末端区域的二硫键连接与先前报道的gp 120 HIV-1 Env单体形式中的二硫键连接不同。此外，在该区域检测到二硫键的异质性。这些数据表明，V1/V2区不具有单一的保守二硫键模式，并且变异性可能影响表达的Env的免疫原性。
Disulfide bonding of cysteines is one of the most important protein modifications, and it plays a key role in establishing/maintaining protein structures in biologically active forms. Therefore, the determination of disulfide bond arrangement is one important aspect to understanding the chemical structure of a protein and defining its functional domains. Herein, aiming to understand how the HIV-1 envelope protein’s structure influences its immunogenicity, we used an MS-based approach, liquid chromatography electrospray ionization Fourier transform ion cyclotron resonance (LC/ESI-FTICR) mass spectrometry, to determine the disulfide linkages on an oligomeric form of the group M consensus HIV-1 envelope protein (Env), CON-S gp140 ΔCFI. This protein has marked improvement in its immunogenicity, compared to monomeric gp120 and wild-type forms of gp140 Envs. Our results demonstrate that the disulfide connectivity in the N-terminal region of CON-S gp140 ΔCFI is different from the disulfide bonding previously reported in the monomeric form of gp120 HIV-1 Env. Additionally, heterogeneity of the disulfide bonding was detected in this region. These data suggest that the V1/V2 region does not have a single, conserved disulfide bonding pattern, and that variability could impact immunogenicity of expressed Envs.
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