Life Cell Imaging of mRNA Using PNA FIT Probes

Life Cell Imaging of mRNA Using PNA FIT Probes
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使用 PNA FIT 探针对 mRNA 进行生命细胞成像

DOI:
10.1002/9783527687503.ch24
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发表时间:
2014
期刊:
影响因子:
--
通讯作者:
O. Seitz
O. Seitz
中科院分区:
--
文献类型:
--
作者:
A. Knoll;S. Kummer;F. Hövelmann;A. Herrmann;O. Seitz

文献摘要

参考文献

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本章描述了使用基于肽核酸的FIT强制嵌入探针进行活细胞核糖核酸(RNA)成像,该探针能够同时定位两个病毒信使核糖核酸(mRNA)分子。为了验证该方法的生物学有效性,我们培养了Madin - Darby犬肾(MDCK)细胞,并用流感病毒A/PR/8 (H1N1)感染。成像探针靶向的mRNA片段的选择是基于先前的工作,这证明了细胞和病毒转录组中的可及性和独特性。肽核酸(PNA) FIT‐探针含有一种单一的菁染料,属于噻唑橙(to)家族的插层染料。PNA FIT -探针响应环境敏感to -染料周围粘度的变化。
This chapter describes the live cell Ribonucleic acid (RNA) imaging with peptide nucleic acid‐based FIT forced intercalation probes that enabled a simultaneous localization of two viral messenger ribonucleic acid (mRNA) molecules. For the biological validation of the method, Madin‐Darby Canine Kidney (MDCK) cells are cultivated and infected with influenza A/PR/8 virus (H1N1). The selection of the mRNA segments targeted by the imaging probes was based on previous work, which demonstrated the accessibility and uniqueness within the cellular and viral transcriptome. The peptide nucleic acid (PNA) FIT‐probes contain a single cyanine dye that belongs to the thiazole orange (TO) family of intercalator dyes. PNA FIT‐probes respond to changes of the viscosity around the environmentally sensitive TO‐dye.
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