Visualization of a Limonene Synthesis Metabolon Inside Living Bacteria by Hyperspectral SRS Microscopy.
Visualization of a Limonene Synthesis Metabolon Inside Living Bacteria by Hyperspectral SRS Microscopy.
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DOI：
10.1002/advs.202203887
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发表时间：
2022-11
期刊：
影响因子：
15.1
通讯作者：
Cheng, Ji-Xin
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Zhang, Jing;Shin, Jonghyeon;Tague, Nathan;Lin, Haonan;Zhang, Meng;Ge, Xiaowei;Wong, Wilson;Dunlop, Mary J.;Cheng, Ji-Xin
在单细胞水平监测生物合成活性是代谢工程的关键，但仍然难以以无标记的方式实现。使用670-900 cm-1区域的高光谱受激拉曼散射成像，在工程大肠杆菌内可视化局部柠檬烯合成。柠檬烯和GFP融合的柠檬烯合酶的共定位通过共记录的受激拉曼散射和双光子荧光图像来证实。这一发现表明柠檬烯合成代谢子在细胞内具有极性分布。这一发现扩展了工程菌中柠檬烯从头生物合成的知识，并突出了SRS化学成像在代谢工程研究中的潜力。在单细胞水平监测生物合成活性是代谢工程的关键，但仍然难以以无标记的方式实现。在这里，使用高光谱受激拉曼散射直接可视化单个工程大肠杆菌内富含柠檬烯聚集体的化学组成和合成功能。这表明细胞内有柠檬烯合成代谢子。
Monitoring biosynthesis activity at single‐cell level is key to metabolic engineering but is still difficult to achieve in a label‐free manner. Using hyperspectral stimulated Raman scattering imaging in the 670–900 cm−1 region, localized limonene synthesis are visualized inside engineered Escherichia coli. The colocalization of limonene and GFP‐fused limonene synthase is confirmed by co‐registered stimulated Raman scattering and two‐photon fluorescence images. The finding suggests a limonene synthesis metabolon with a polar distribution inside the cells. This finding expands the knowledge of de novo limonene biosynthesis in engineered bacteria and highlights the potential of SRS chemical imaging in metabolic engineering research. Monitoring biosynthesis activity at the single‐cell level is key to metabolic engineering but is still difficult to achieve in a label‐free manner. Here, the chemical composition and synthetic function of the limonene‐rich aggregates inside single engineered Escherichia coli is directly visualized using hyperspectral stimulated Raman scattering. It suggests a limonene synthesis metabolon inside the cells.
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影响因子：
13.6
作者：
Dong PT;Zong C;Dagher Z;Hui J;Li J;Zhan Y;Zhang M;Mansour MK;Cheng JX
通讯作者：
Cheng JX
影响因子：
48
作者：
Hu, Fanghao;Shi, Lixue;Min, Wei
通讯作者：
Min, Wei
影响因子：
28.3
作者：
Lee, Kang Soo;Palatinszky, Marton;Stocker, Roman
通讯作者：
Stocker, Roman
DOI：
10.1126/science.aac6054
发表时间：
2016-02-12
期刊：
Science (New York, N.Y.)
影响因子：
--
作者：
French JB;Jones SA;Deng H;Pedley AM;Kim D;Chan CY;Hu H;Pugh RJ;Zhao H;Zhang Y;Huang TJ;Fang Y;Zhuang X;Benkovic SJ
通讯作者：
Benkovic SJ
影响因子：
16.6
作者：
Du J;Su Y;Qian C;Yuan D;Miao K;Lee D;Ng AHC;Wijker RS;Ribas A;Levine RD;Heath JR;Wei L
通讯作者：
Wei L