Use of micro-emulsion technology for the directed evolution of antibodies.
Use of micro-emulsion technology for the directed evolution of antibodies.
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利用微乳液技术进行抗体的定向进化。
DOI：
10.1016/j.ymeth.2012.07.007
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发表时间：
2012
期刊：
影响因子：
--
通讯作者：
Kiss,MargaretM
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Buhr,DianeL;Acca,FelicityE;Holland,ErikaG;Johnson,Katie;Maksymiuk,GailM;Vaill,Ada;Kay,BrianK;Weitz,DavidA;Weiner,MichaelP;Kiss,MargaretM
亲和试剂，如抗体，是研究复杂混合物和组织中蛋白质表达模式、亚细胞定位和翻译后修饰所必需的。噬菌体乳化、分泌和捕获(EASH)是一种新型的微乳液技术，它利用油包水(W/O)乳液来鉴定和分离分泌展示所需抗体的噬菌体颗粒的细胞。使用这种方法，一个大的抗体展示噬菌体文库将结合在单个隔间的珠子上。噬菌体微乳技术不是对大的混合种群进行生物扫描，而是允许我们针对抗原单独查询扩增的噬菌体克隆种群。使用乳剂产生微滴有望通过允许精细区分与目标结合的动力学参数来加速噬菌体选择实验。在这项研究中，我们展示了噬菌体微乳技术能够区分结合亲和力相差300倍的两个scFv(分别为100 nm和300pM)。此外，我们还介绍了噬菌体微乳技术在筛选耐高温单链抗体中的应用。
Affinity reagents, such as antibodies, are needed to study protein expression patterns, sub-cellular localization, and post-translational modifications in complex mixtures and tissues. Phage Emulsion, Secretion, and Capture (ESCape) is a novel micro-emulsion technology that utilizes water-in-oil (W/O) emulsions for the identification and isolation of cells secreting phage particles that display desirable antibodies. Using this method, a large library of antibody-displaying phage will bind to beads in individual compartments. Rather than using biopanning on a large mixed population, phage micro-emulsion technology allows us to individually query clonal populations of amplified phage against the antigen. The use of emulsions to generate microdroplets has the promise of accelerating phage selection experiments by permitting fine discrimination of kinetic parameters for binding to targets. In this study, we demonstrate the ability of phage micro-emulsion technology to distinguish two scFvs with a 300-fold difference in binding affinities (100nM and 300pM, respectively). In addition, we describe the application of phage micro-emulsion technology for the selection of scFvs that are resistant to elevated temperatures.
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酵母生长培养物中蛋白质和核酸周转的研究。
DOI：
10.1016/0006-3002(58)90333-0
发表时间：
1958
期刊：
Biochimica et biophysica acta
影响因子：
--
作者：
H. Halvorson
通讯作者：
H. Halvorson
来自玉米黑粉菌病毒染色 P1 的主要衣壳多肽的体外翻译。
影响因子：
5
作者：
R. E. Dalton;G. K. Podila;W. Flurkey;R. F. Bozarth
通讯作者：
R. F. Bozarth
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影响因子：
2.6
作者：
T. Peery;Yigal Koltin;A. Tamarkin
通讯作者：
A. Tamarkin
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影响因子：
5.3
作者：
T. Peery;T. Shabat;R. Steinlauf;Y. Koltin;J. Bruenn
通讯作者：
J. Bruenn
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3.7
作者：
R. F. Bozarth;Y. Koltint;M. Weissman;R. Parker;R. E. Dalton;R. Steinlauf
通讯作者：
R. Steinlauf