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Enzymmarkierte DNA an elektrisch geheizten Elektroden

电热电极上的酶标记 DNA

基本信息

批准号：
16442156
负责人：
Professor Dr. Gerd-Uwe Flechsig
金额：
--
依托单位：
Fakultät Angewandte Naturwissenschaften
依托单位国家：
德国
项目类别：
Research Grants
财政年份：
2005
资助国家：
德国
起止时间：
2004-12-31 至 2010-12-31
项目状态：
已结题

来源：
https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/16442156?language=en
关键词：
Enzymmarkierte DNA elektrisch geheizten Elektroden

项目摘要

Neben der herkömmlichen optischen Detektion von Hybridisierungsvorgängen der Nukleinsäuren auf DNA-Chips werden seit über 10 Jahren auch vielversprechende neuartige elektrochemische Analysemethoden entwickelt, die sich als leistungsfähige, preiswerte und einfach zu handhabende Alternativen für einen Einsatz in Medizin und Forschung anbieten. Im geplanten Projekt soll die zeitaufwändige, teure und fehleranfällige Polymerase-Kettenreaktion (PCR) zur Vervielfachung und damit zur Erhöhung der zu bestimmenden DNA-Konzentration durch eine neue hochempfindliche Detektionsmethode ersetzt oder zumindest unterstützt werden. Dazu sollen enzymmarkierte DNA-Stränge an geheizten Elektroden zum Einsatz kommen. Die katalytische Wirkung des Enzymmoleküls erzeugt bei der elektrochemischen Detektion große Mengen redoxaktiver Substanzen und führt daher zu einer um Größenordnungen höheren Empfindlichkeit als bei den herkömmlichen Redoxmarkern. Gewöhnliche Enzymmarker sind jedoch hitzeempfindlich und würden die bei einer stringenten Hybridisierung auftretenden hohen Temperaturen nicht vertragen. Alternativ in Frage kommende hitzebeständige Enzyme (z.B. aus thermophilen Organismen) sind jedoch erst bei hohen Temperaturen voll aktiv. Erste Untersuchungen in unserer Gruppe mit geheizten Elektroden zeigten, dass sich die Hybridisierung der Nukleinsäuren an geheizten Elektroden stark beschleunigen lässt und damit eine erhebliche Verbesserung der Hybridisierungsdetektion möglich ist. Daher sollen im geplanten Projekt geheizte Elektroden zur Durchführung und Detektierung der Hybridisierung sowie zu einer optimalen Einstellung der Elektrodentemperatur für eine maximale Aktivität des Enzymmarkers zum Einsatz kommen..

利用DNA芯片韦尔登进行核酸杂交的最佳检测已有10年的历史，也有许多新的电化学分析方法，这些方法对医学和研究中的一种替代方法具有很高的实用性、优越性和重要性。本项目旨在通过一种新的高效化学检测方法或韦尔登方法对DNA进行快速、准确的聚合酶链反应（PCR）检测。因此需要酶标记DNA链，然后用电动机进行检测。Die katalytische Wirkung des Enzymmoleküls erzeugt bei der elektrochemischen Detektion große Mengen redoxaktiver Substanzen und führt daher zu einer um Größnungen höheren Emptindlichkeit als bei den herkömmlichen Redoxmarkern. Gewöhnliche Enzymmarker sind jedoch hitzempfindlich and würden die bei iner stringenten Hybridisierung auftretenden hohen Temperaturen nicht vertragen. Alternativ in Frage kommende hitzebeständige Enzyme（z.B.（来自嗜热生物）在高温下会迅速死亡。首先，在我们的集团中，使用电动机进行混合动力测试，结果表明，混合动力测试与电动机测试完全一致，而且混合动力测试的结果非常一致。Daher sollen im geplanten Projekt geheizte Elektroden zur Durchführung und Detektierung der Hybridisierung sowie zu einer optimalen Einstellung der Elektrodentemperatur für eine maximale Aktivität des Enzymmarkers zum Einerkommen..