Co- and post-translational engineering of the therapeutic protein Erythropoietin with non-natural amino acids

治疗性蛋白质促红细胞生成素与非天然氨基酸的共翻译和翻译后工程

• 批准号: 223327590
• 负责人: Dr. Marina Rubini
• 金额: --
• 依托单位: Arbeitsgruppe Organische Chemie / Zelluläre Chemie
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Priority Programmes
• 财政年份: 2012
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 2011-12-31 至 2014-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/223327590?language=en
• 关键词: Co; post; translational; engineering; therapeutic

Die Behandlung von Krebs ist eine der dringlichsten und wichtigsten medizinischen und gesellschaft-lichen Herausforderungen. Erythropoietin (EPO) kann die negativen Nebenwirkungen bei der Chemotherapie abschwächen und die Prognose verbessern. Sowohl aus pharmakologischer als auch aus biochemischer Sicht ist die Herstellung stabiler EPO Analoga mit homogenen Glykosilierungen eine absolute Notwendigkeit. Hier schlage ich den Einsatz nicht-natürlicher Aminosäuren vor, um (i) die Stabilität von rekombinantem EPO zu erhöhen und (ii) orthogonale Gruppen für die chemo-selektive Kopplung von Kohlenhydraten via Klick-Chemie zu schaffen. EPO Varianten mit fluorinierten Aminosäuren und komplexen vierarmigen Zuckerketten werden hergestellt und charakterisiert werden, um eine Korrelation mit der Stabilität der EPO Analoga hinsichtlich thermischer Denaturierung, Aggregation und Proteolyse sowie ihrer Biodistribution und erythropoetischer Wirksamkeit zu etablieren. Diese Ergebnisse das Verständnis der Wechselwirkung von Zuckerketten mit Proteinen vorantreiben. Auf lange Sicht könnten die in diesem Projekt gewonnenen Einsichten und das dabei etablierte molekulare Methodenrepertoire eingesetzt werden, um die Effizienz der EPO Verabreichung zu steigern, und Strategien zur Herstellung und systematischen Optimierung therapeutischer und anderer Proteine mit post-translationalen Modifikationen aufzeigen.

对克雷布斯的治疗是一种药物治疗，也是一种治疗方法。促红细胞生成素（EPO）可作为化疗的阴性药物，并可用于预后判断。因此，药物也可从生化实验室获得稳定的EPO类似物，其具有均一的糖基化作用。在此，我选择了一种非天然氨基化合物，即（i）稳定EPO的稳定性和（ii）通过Klick-Chemie对Kohlenhydraten进行化学选择性的正交分组。含氟氨基复合物的EPO变体韦尔登具有良好的生物学特性和韦尔登特性，并与EPO类似物的热变性、聚集和蛋白水解的稳定性相关，从而提高了EPO类似物的生物分布和红细胞生成能力。这一结果表明，Zuckerketten的Wechselechtungung与蛋白质的结合是正确的。随着时间的推移，我们可以在Einsichten项目和韦尔登中找到EPO验证的有效性，并对EPO进行优化治疗和系统化治疗，以及对蛋白质进行后修饰。