Triple-Quadrupol-Massenspektrometer mit gekoppelter HPLC-Anlage
带耦合 HPLC 系统的三重四极杆质谱仪
基本信息
- 批准号:244428347
- 负责人:
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- 依托单位:
- 依托单位国家:德国
- 项目类别:Major Research Instrumentation
- 财政年份:2014
- 资助国家:德国
- 起止时间:2013-12-31 至 无数据
- 项目状态:未结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
Die relative und auch absolute Quantifizierung von Proteinen in komplexen biologischen Proben stellt eine besondere Herausforderung an massenspektrometrische Methoden dar. In der Arbeitsgruppe Enzymologie des Institutes für Biochemie und Biotechnologie können sehr einfach isotopen-markierte Peptide hergestellt und über einen biochemischen Trick quantifiziert werden. Gleichzeitig erlaubt die in dieser Arbeitsgruppe etablierte Peptid-Mikroarray-Technologie nahezu ungeahnte Möglichkeiten der Identifizierung potentieller in vivo Substrate für verschiedenen Enzymklassen, die Proteine posttranslational modifizieren können. Damit steht erstmals eine umfassende Liste von potentiellen Enzym/Substrat-Paaren zur Verfügung. Für die Validierung dieser gefundenen Enzym/Substrat-Paare ist das Triple-Quadrupol-Massenspektrometer mit der beantragten Kopplung hervorragend geeignet, da es sowohl die geforderte hohe Massengenauigkeit, Auflösung und Empfindlichkeit besitzt, die für die Identifizierung der proteotypischen Peptide notwendig ist und da es ebenfalls sehr gute Fragment-Ionenspektren für die Modifikationsanalysen liefert. Somit eröffnen sich völlig neue Möglichkeiten der biochemischen Forschung durch die Kombination von Peptid-Mikroarray- Analysen und „multiple reaction monitoring“ (MRM) mittels Triple-Quadrupol-Massenspektrometrie.
在复杂的生物学实验中,蛋白质的相对和绝对定量是一种质谱方法。在生物化学和生物技术研究所的酶学工作组中,我们发现了一种同位素标记肽和一种生物化学定量韦尔登。Gleichzeitig erlaubt die in dieser Arbeitsgruppe etablierte Peptid-Mikroarray-Technologie nahezu ungeahnte Möglichkeiten der Identifizierung potentieller in vivo Substrate für versedenen Enzymklassen,die Proteine posttranslational modifieren könnnen. Damit steht estmals eine umfassessment Liste von potentielen Enzyme/Substrat-Paaren zur Verfügung.为了验证酶/底物的活性,我们使用了三重四极质谱仪,该质谱仪具有良好的质谱、扩增和增强功能,但蛋白质型肽的鉴定并不容易,而且对于修饰肽的分析也有很好的片段-离子谱。通过结合肽-微阵列-分析和“多反应监测”(MRM)的三重四极杆质谱法,可以获得新的生物化学研究方法。
项目成果
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