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次世代型治療法開発の分子基盤となる肺炎球菌による宿主オートファジー回避機構の解析

分析肺炎球菌的宿主自噬逃避机制，作为开发下一代治疗方法的分子基础

基本信息

批准号：
21J12222
负责人：
雫石早矢佳
金额：
$ 0.96万
依托单位：
Yokohama City University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-28 至 2023-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21J12222/
关键词：
肺炎球菌 NanoLuc NanoBiT

项目摘要

肺炎球菌は主にヒトの鼻咽頭に常在し通常は無症候性であるが、小児や免疫力が低下した高齢者では敗血症や髄膜炎といった侵襲性肺炎球菌感染症(IPD)を引き起こす。近年、IPDを引き起こす経路の一つとして、宿主細胞へと侵入した肺炎球菌が、膜孔形成毒素Pneumolysin（Ply）によってエンドソーム膜を損傷することでエンドソーム内環境の酸性化を抑制し、リソソームによる殺菌を逃れ血中や髄液へと移行する経路が明らかになってきている。一方で、過度なエンドソーム膜の損傷は宿主殺菌機構であるオートファジー誘導の引き金ともなることから、肺炎球菌の新たな細胞内生存戦略としてPlyによるエンドソーム膜損傷を制御している可能性について解析を行った。最初に、HiBiTとLgBiTを用いたluciferase assay によりエンドソーム膜損傷を定量化するアッセイ系を構築した。次に、構築した系を基盤として、肺炎球菌感染時にエンドソーム膜損傷を制御する病原因子を探索した。その結果、肺炎球菌の菌体表層に局在するグリコシダーゼがPly依存的なエンドソーム膜損傷を抑制することが示唆された。さらに、このエンドソーム膜損傷抑制は肺炎球菌に対する殺菌的なオートファジー誘導の低下と、それに伴う菌の細胞内生残性の向上をもたらすことも示唆された。

Pneumococcal infection is usually asymptomatic, with low immunity, sepsis, and invasive pneumococcal infection (IPD). In recent years, IPD has led to a rapid increase in the number of host cell invasions, pneumococcal invasion, and membrane pore-forming toxin Pneumolysin (Ply), which inhibits and alleviates the acidification of the internal environment. A new intracellular survival strategy for pneumococci was developed by analyzing the possibility of preventing membrane damage in host cells. Initially, HiBiT and LgBiT were used to construct a system for quantifying membrane damage. To explore the pathogenic factors that prevent membrane damage during pneumococcal infection. As a result, pneumococcal bacteria surface layer in the Ply-dependent inhibition of membrane damage In addition, the membrane damage of pneumococcus is inhibited by the induction of low and high levels of endogenous bacteria.