ミトコンドリアの細胞内分布の破綻が惹起するプリオン病の神経変性機構の解明

阐明线粒体细胞内分布破坏引起的朊病毒病的神经退行性机制

• 批准号: 21J10124
• 负责人: 清水 琢音
• 金额: $ 0.96万
• 依托单位: Azabu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-28 至 2023-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21J10124/
• 关键词: 14-3-3タンパク質; Tom複合体; プリオンタンパク質; 熱ショックタンパク質; ミトコンドリア; プリオン病; 分子シャペロン

2022年度は細胞質におけるPrPのミトコンドリアへの標的化機構を明らかとするため、タンパク質のミトコンドリアへの局在に関与する分子シャペロンとPrPの相互作用の検出を試みた。前年度にRNA干渉を用いた阻害実験によって関与が見出された14-3-3タンパク質とPrPの相互作用の検出を免疫沈降法とウェスタンブロットを用いた実験系によって試みたところ、7つのアイソフォームから構成される14-3-3タンパク質のいずれともPrPの相互作用が検出されなかった。一方でPrPはタンパク質の輸送や分解の制御に関与し、細胞内のタンパク質恒常性を維持することが知られている熱ショックタンパク質70 (HSP70) ファミリーのHSC70と安定した複合体を形成することが見出された。14-3-3タンパク質はミトコンドリアや細胞質に局在する分子であるTOMM34を介してHSP70のリフォールディング効果を調節することも報告されていることから、14-3-3タンパク質が間接的にPrPのミトコンドリアへの標的化を制御している可能性が示唆された。また、前年度にミトコンドリア外膜上のタンパク質の受容体であるTom複合体のうち、Tom70の発現阻害がPrPのミトコンドリアへの局在を阻害した結果を踏まえ、ミトコンドリア内におけるPrPとTom70の局在を蛍光免疫染色によって観察したところ、ミトコンドリア内においてPrPとTom70の共局在は観察されなかった。以上の結果から、ミトコンドリアに標的化したPrPはTom70によって認識された後、Tom複合体と異なる局在をとる可能性が示唆された。

2022 annual は cytoplasm に お け る PrP の ミ ト コ ン ド リ ア へ の mark the agency を Ming ら か と す る た め, タ ン パ ク qualitative の ミ ト コ ン ド リ ア へ の bureau in に masato and す る molecular シ ャ ペ ロ ン と PrP の interaction の 検 try out を み た. Dry before annual に RNA involved を with い た resistance against be 験 に よ っ て masato and が see さ れ た 14-3-3 タ ン パ ク qualitative と PrP の interaction の 検 を immune sink method と ウ ェ ス タ ン ブ ロ ッ ト を with い た be 験 department に よ っ て try み た と こ ろ, 7 つ の ア イ ソ フ ォ ー ム か ら constitute さ れ る 14-3-3 タ ン パ ク qualitative の い ず れ と も PrP <s:1> interaction が検 results in されな されな った った. Side で PrP は タ ン パ ク qualitative の conveying や decomposition の suppression に masato and し, intracellular の タ ン パ ク mass constancy を maintain す る こ と が know ら れ て い る hot シ ョ ッ ク タ ン パ ク mass 70 (HSP70) フ ァ ミ リ ー の HSC70 と settle し た complex を form す る こ と が shows さ れ た. The 14-3-3 タ ン パ ク qualitative は ミ ト コ ン ド リ ア や cytoplasm に bureau in す る molecular で あ る TOMM34 を interface し て HSP70 の リ フ ォ ー ル デ ィ ン グ unseen fruit を adjust す る こ と も report さ れ て い る こ と か ら, the 14-3-3 タ ン パ ク qualitative が indirect に PrP の ミ ト コ ン ド リ ア へ の mark the を suppression し て い る can The ability が indicates された. ま た, former annual に ミ ト コ ン ド リ ア outer membrane の タ ン パ ク qualitative の is let body で あ る Tom complex の う ち, Tom70 の 発 now resistance against が PrP の ミ ト コ ン ド リ ア へ の bureau in を resistance against し た results を tread ま え, ミ ト コ ン ド リ ア within に お け る PrP と Tom70 の bureau in を 蛍 light immune dyeing に よ っ て 観 examine し た と こ ろ Youdaoplaceholder0 トコ ドリア ドリア にお てPrPとTom70 <s:1> are co-located in 観 観 cha されな った った った. の above results か ら, ミ ト コ ン ド リ ア に mark the し た PrP は Tom70 に よ っ て know さ れ た と different な composite, Tom る bureau in を と が る possibility in stopping さ れ た.

项目成果

Analysis the mechanism of ectopic localization of PrP to mitochondria

PrP异位定位线粒体的机制分析

• 发表时间: 2022
• 作者: Takuto Shimizu;Masaki Nagane;Tadashi Yamashita;Naomi Hachiya
• 通讯作者: Naomi Hachiya

Endothelial ganglioside GM3 regulates angiogenesis in solid tumors

内皮神经节苷脂 GM3 调节实体瘤中的血管生成

• DOI: 10.1016/j.bbrc.2021.06.063
• 发表时间: 2021
• 期刊: Biochemical and Biophysical Research Communications
• 影响因子: 3.1
• 作者: Suzuki Mira;Nagane Masaki;Kato Kazuhiro;Yamauchi Akinori;Shimizu Takuto;Yamashita Hiroko;Aihara Naoyuki;Kamiie Junichi;Kawashima Nagako;Naito Shokichi;Yamashita Tadashi
• 通讯作者: Yamashita Tadashi

第95回 日本生化学会大会

第95届日本生化学会年会

• 发表时间: 2022
• 作者: 清水 琢音;永根 大幹;山下 匡;八谷 如美
• 通讯作者: 八谷 如美

Ganglioside <scp>GM3</scp> deficiency enhances mast cell sensitivity

神经节苷脂<scp>GM3</scp>缺乏增强肥大细胞敏感性

• DOI: 10.1111/febs.16806
• 发表时间: 2023
• 期刊: The FEBS Journal
• 作者: Komuro Mariko;Mizugaki Hinano;Nagane Masaki;Morimoto Misako;Fukuyama Tomoki;Ogihara Kikumi;Naya Yuko;Yokomori Emi;Kaneshima Kimika;Kawakami Yasushi;Kamiie Junichi;Shibata Yuki;Suzuki Mira;Shimizu Takuto;Kawashima Nagako;Okamoto Mariko;Ikeda Teruo;Yamashit
• 通讯作者: Yamashit