ミトコンドリアの細胞内分布の破綻が惹起するプリオン病の神経変性機構の解明

阐明线粒体细胞内分布破坏引起的朊病毒病的神经退行性机制

基本信息

批准号：
21J10124
负责人：
清水琢音
金额：
$ 0.96万
依托单位：
Azabu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-28 至 2023-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

2022年度は細胞質におけるPrPのミトコンドリアへの標的化機構を明らかとするため、タンパク質のミトコンドリアへの局在に関与する分子シャペロンとPrPの相互作用の検出を試みた。前年度にRNA干渉を用いた阻害実験によって関与が見出された14-3-3タンパク質とPrPの相互作用の検出を免疫沈降法とウェスタンブロットを用いた実験系によって試みたところ、7つのアイソフォームから構成される14-3-3タンパク質のいずれともPrPの相互作用が検出されなかった。一方でPrPはタンパク質の輸送や分解の制御に関与し、細胞内のタンパク質恒常性を維持することが知られている熱ショックタンパク質70 (HSP70) ファミリーのHSC70と安定した複合体を形成することが見出された。14-3-3タンパク質はミトコンドリアや細胞質に局在する分子であるTOMM34を介してHSP70のリフォールディング効果を調節することも報告されていることから、14-3-3タンパク質が間接的にPrPのミトコンドリアへの標的化を制御している可能性が示唆された。また、前年度にミトコンドリア外膜上のタンパク質の受容体であるTom複合体のうち、Tom70の発現阻害がPrPのミトコンドリアへの局在を阻害した結果を踏まえ、ミトコンドリア内におけるPrPとTom70の局在を蛍光免疫染色によって観察したところ、ミトコンドリア内においてPrPとTom70の共局在は観察されなかった。以上の結果から、ミトコンドリアに標的化したPrPはTom70によって認識された後、Tom複合体と異なる局在をとる可能性が示唆された。

在2022年，我们试图检测PRP与参与线粒体蛋白质定位的分子伴侣之间的相互作用，以揭示靶向细胞质中PRP的机制。当发现在上一年使用RNA干扰参与的14-3-3蛋白与PRP之间的相互作用的检测是使用免疫沉淀和蛋白质印迹的实验系统尝试的，未发现PRP的相互作用与14-3-3-3蛋白中的任何一个相互作用。另一方面，发现PRP与HSC70（HSC70）形成稳定的复合物，HSC70是热休克蛋白70（HSP70）的家族，已知参与控制蛋白质转运和降解并维持细胞内蛋白质稳态。还据报道，14-3-3蛋白通过Tomm34（一种位于线粒体和细胞质的分子Tomm34）调节HSP70的重新折叠作用，这表明14-3-3蛋白可能间接调节PRP对线粒体的靶向。此外，鉴于抑制TOM70表达的结果在上一年抑制了PRP在线粒体中抑制了PRP在线粒体上的蛋白质受体中，在上一年，在线粒体上的蛋白质受体在线粒体内的定位是通过荧光免疫构成和NOT PRP PRP PRP的定位。以上结果表明，靶向线粒体的PRP可以被TOM70识别，然后与TOM复合物的定位不同。

项目成果

期刊论文数量（6）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Analysis the mechanism of ectopic localization of PrP to mitochondria

PrP异位定位线粒体的机制分析

DOI：
发表时间：
2022
期刊：
影响因子：
0
作者：
Takuto Shimizu;Masaki Nagane;Tadashi Yamashita;Naomi Hachiya
通讯作者：
Naomi Hachiya

Endothelial ganglioside GM3 regulates angiogenesis in solid tumors

内皮神经节苷脂 GM3 调节实体瘤中的血管生成

DOI：
10.1016/j.bbrc.2021.06.063
发表时间：
2021
期刊：
Biochemical and Biophysical Research Communications
影响因子：
3.1
作者：
Suzuki Mira;Nagane Masaki;Kato Kazuhiro;Yamauchi Akinori;Shimizu Takuto;Yamashita Hiroko;Aihara Naoyuki;Kamiie Junichi;Kawashima Nagako;Naito Shokichi;Yamashita Tadashi
通讯作者：
Yamashita Tadashi

第95回日本生化学会大会

第95届日本生化学会年会

DOI：
发表时间：
2022
期刊：
影响因子：
0
作者：
清水琢音;永根大幹;山下匡;八谷如美
通讯作者：
八谷如美

Ganglioside <scp>GM3</scp> deficiency enhances mast cell sensitivity

神经节苷脂<scp>GM3</scp>缺乏增强肥大细胞敏感性

DOI：
10.1111/febs.16806
发表时间：
2023
期刊：
The FEBS Journal
影响因子：
0
作者：
Komuro Mariko;Mizugaki Hinano;Nagane Masaki;Morimoto Misako;Fukuyama Tomoki;Ogihara Kikumi;Naya Yuko;Yokomori Emi;Kaneshima Kimika;Kawakami Yasushi;Kamiie Junichi;Shibata Yuki;Suzuki Mira;Shimizu Takuto;Kawashima Nagako;Okamoto Mariko;Ikeda Teruo;Yamashit
通讯作者：
Yamashit