Clarification of wilting mechanism of pine wilt disease

3年生アカマツ苗に、自然光の明条件区と被陰した暗黒条件区という2つの処理区を設け、それぞれにマツノザイセンチュウを接種して、接種後数日おきにMRIを用いた非破壊観察により通水阻害の進展をモニタリングした。明条件区の接種苗では、通水阻害は従来の研究報告に見られるのと同様の樹脂道周囲のパッチ状のエンボリズムと、主に接種部を中心として扇型ないし不定形に広がった面的なエンボリズムの2種類が観察されたのに対して、暗黒条件区の接種苗では、通水阻害が年輪に沿って接線方向に拡大することがわかった。通水阻害に寄与する樹脂等の成分について検討するため、材線虫病によって枯死した野外クロマツ成木の枝と、半枯れ状態の生存木の枝、健全木の枝のサンプルから樹脂成分を溶媒抽出して、ガスクロマトグラフィーにより分析し、ピークを示す成分の同定を行った。通水阻害や仮道管内の物質分布を観察する手法として、凍結状態でサンプルを高倍率で観察できるクライオSEM法は極めて有効であるが、装置が森林総研など限られた施設にしかないため、手軽に観察することできない。そこで、通常のSEMの試料室内で、凍結したサンプルを凍ったままSEM観察する手法について検討した。凍結したまま観察できる時間が30分程度に制限されてしまうという欠点はあるが、観察は可能であった。今後の接種試験に用いるため、線虫の近親交配株を多数作出した結果、多くの遺伝子がホモとなっていることを確認した。材線虫接種後の通水阻害の進展を成木において明らかにするための準備として、筑波大学構内に植栽した健全なアカマツ成木の樹液流速分布をMRIにより可視化することができた。

3年生アカマツ苗に、自然光の明条件区と被陰した暗黒条件区という2つの処理区を設け、それぞれにマツノザイセンチュウを接種して、接種後数日おきにMRIを用いた非破壊観察により通水阻害の進展をモニタリングした。明条件区の接種苗では、通水阻害は従来の研究報告に見られるのと同様の樹脂道周囲のパッチ状のエンボリズムと、主に接種部を中心として扇型ないし不定形に広がった面的なエンボリズムの2種類が観察されたのに対して、暗黒条件区の接種苗では、通水阻害が年輪に沿って接線方向に拡大することがわかった。通水阻害に寄与する樹脂等の成分について検討するため、材線虫病によって枯死した野外クロマツ成木の枝と、半枯れ状態の生存木の枝、健全木の枝のサンプルから樹脂成分を溶媒抽出して、ガスクロマトグラフィーにより分析し、ピークを示す成分の同定を行った。通水阻害や仮道管内の物質分布を観察する手法として、凍結状態でサンプルを高倍率で観察できるクライオSEM法は極めて有効であるが、装置が森林総研など限られた施設にしかないため、手軽に観察することできない。そこで、通常のSEMの試料室内で、凍結したサンプルを凍ったままSEM観察する手法について検討した。凍結したまま観察できる時間が30分程度に制限されてしまうという欠点はあるが、観察は可能であった。今後の接種試験に用いるため、線虫の近親交配株を多数作出した結果、多くの遺伝子がホモとなっていることを確認した。材線虫接種後の通水阻害の進展を成木において明らかにするための準備として、筑波大学構内に植栽した健全なアカマツ成木の樹液流速分布をMRIにより可視化することができた。