ドライバー遺伝子陽性肺癌におけるYAP1を標的とした新規治療法の開発

研究計画に従い、1人のROS1陽性肺癌患者から癌細胞を採取し、ロルラチニブ感受性細胞株(KTOR71)を樹立した。プロテオーム解析の結果、ROS1陽性肺癌におけるロルラチニブ治療からの初期生存規定因子の候補としてYAP1に着目した。次に、蛍光免疫染色を用いて、YAP1の局在を評価したところ、ロルラチニブ治療によるYAP1の活性化が確認された。次に、YAP1の機能解析を行った。KTOR71細胞において、siRNA を用いたYAP1ノックダウン、ベルテポルフィンを用いた薬剤でのYAP1阻害ともに、ロルラチニブへの感受性を亢進した。次に、ROS1の下流にある細胞増殖・抗アポトーシスをもたらす PI3 キナーゼ/AKT 経路のシグナル活性について解析した。その結果、ロルラチニブ治療下でAKTが再活性化すること、YAP1を阻害するとAKTの再活性化が抑制されること、AKTを阻害するとYAP1を阻害した場合と同様にロルラチニブへの感受性が亢進することが確認された。これらの結果から、活性化したYAP1はAKTの再活性化を介して細胞生存を促進していることが示唆された。次に免疫不全マウスにKTOR71細胞を皮下注射して異種移植モデルを作成し、ROS1とYAP1 を標的とした治療が有効かをin vivoで検討した。ロルラチニブとベルテポルフィンの併用療法は、ロルラチニブ単独療法と比較して、治療終了後の腫瘍の再増大を有意に抑制した。以上から、ROS1陽性肺癌においてYAP1がAKT活性を制御することで、ロルラチニブ治療からの初期生存を制御している可能性が示唆された。

研究計画に従い、1人のROS1陽性肺癌患者から癌細胞を採取し、ロルラチニブ感受性細胞株(KTOR71)を樹立した。プロテオーム解析の結果、ROS1陽性肺癌におけるロルラチニブ治療からの初期生存規定因子の候補としてYAP1に着目した。次に、蛍光免疫染色を用いて、YAP1の局在を評価したところ、ロルラチニブ治療によるYAP1の活性化が確認された。次に、YAP1の機能解析を行った。KTOR71細胞において、siRNA を用いたYAP1ノックダウン、ベルテポルフィンを用いた薬剤でのYAP1阻害ともに、ロルラチニブへの感受性を亢進した。次に、ROS1の下流にある細胞増殖・抗アポトーシスをもたらす PI3 キナーゼ/AKT 経路のシグナル活性について解析した。その結果、ロルラチニブ治療下でAKTが再活性化すること、YAP1を阻害するとAKTの再活性化が抑制されること、AKTを阻害するとYAP1を阻害した場合と同様にロルラチニブへの感受性が亢進することが確認された。これらの結果から、活性化したYAP1はAKTの再活性化を介して細胞生存を促進していることが示唆された。次に免疫不全マウスにKTOR71細胞を皮下注射して異種移植モデルを作成し、ROS1とYAP1 を標的とした治療が有効かをin vivoで検討した。ロルラチニブとベルテポルフィンの併用療法は、ロルラチニブ単独療法と比較して、治療終了後の腫瘍の再増大を有意に抑制した。以上から、ROS1陽性肺癌においてYAP1がAKT活性を制御することで、ロルラチニブ治療からの初期生存を制御している可能性が示唆された。