正常細胞が持つがん防御機構を強化する新規抗がん化合物の探索と作用機序解析

寻找增强正常细胞癌症防御机制的新型抗癌化合物并分析其作用机制

• 批准号: 21J14495
• 负责人: 青山 愛
• 金额: $ 0.96万
• 依托单位: Waseda University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-28 至 2023-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21J14495/
• 关键词: 細胞間作用; 細胞運動; 化合物スクリーニング; Lonidamine; Domperidone

正常な細胞にはがん細胞の増殖を制御する仕組みが備わっているが、これが破綻してしまうとがん細胞は正常な組織を破壊しながら増殖を続け腫瘍を形成する。我々は、がん細胞のモデルとして、ドキシサイクリンにより変異型KRAS遺伝子を誘導発現させると形質転換する細胞（以下、KRAS発現細胞）を用いて、非形質転換細胞との混合培養を行ない、非形質転換細胞への増殖抑制効果は示さないが、KRAS発現細胞を非形質転換細胞と共培養した際にのみ、KRAS発現細胞の増殖を抑制する化合物のスクリーニングを行なってきた。通常条件で、KRAS発現細胞は非形質転換細胞を押しのけるようにして増殖して細胞塊を拡大させるが、本研究で同定したLonidamine (LND)やDomperidone(DPD)を添加するとその細胞塊の拡大が抑制される。2022年度は、(1) LNDの標的タンパク質のアフィニティー精製及び質量分析による同定、および(2)これら化合物が、非形質転換細胞の挙動に与える影響についてのライブイメージングによる詳細な解析を行なった。(1)について、LND特異的に結合するタンパク質を同定するため、ラベルフリー定量解析 (Label-free quantification analysis, LFQ analysis)を行うことによって、複数の標的タンパク質候補の同定に成功した。(2)について、KRAS発現細胞と非形質転換細胞を対峙させるような状況における細胞の運動を観察した。通常条件では、非形質転換細胞はKRAS発現細胞と接触すると、KRAS発現細胞が自身の領域を拡大する動きに合わせて後退するように動いた。一方でLNDまたはDPD処理下では、非形質転換細胞が後退する動きが抑制され、元いた場所にとどまる様子が観察された。この細胞運動の抑制の結果、KRAS発現細胞の細胞塊の拡大が阻害されることが示唆された。

Normal cells, cell proliferation, control, control, official group, preparation, and flaws It is the destruction of normal tissue and the proliferation of cells and the formation of tumors and ulcers. I am a 々は, がん cell のモデルとして, ドキシサイクリンにより変 heterogeneous KRAS legacy を-induced 発appearさせるとmorphous morphogen-replaced する cells (hereinafter, KRAS cells) are mixed with いて, non-morphological morphogen-replaced cells and との mixed culture.ない, non-morphologically modified cells and non-morphologically modified cells showing growth inhibitory effect, KRAS expression cells and non-morphologically modified cells. The growth of cultured cells and KRAS cells are inhibited by the use of compounds that inhibit the growth of the cells. Normal conditions are: KRAS cells are amorphous and the cells are non-morphological. Lonidamine is the same as the one used in this study. (LND) Domperidone (DPD) is added to the cell block and inhibits the growth of the cell block. 2022 year, (1) Purification and quality analysis of LND's standard タンパク性のアフィニティーによる同定,および(2)これら compoundが、The influence of non-morphous cell-changing cells and についてのライブイメージングによるDetailed analysis of を行なった. (1) Label-free quantification analysis, LFQ, of label-free and LND-specific label-binding labels and label-free labels. analysis)を行うことによって, pluralのstandardタンパクqualitative candidateの同定に成した. (2) について, KRAS 発 appear cells and non-morphological changes in cells を対事させるようなconditions における Cells のmovement を観Observation した. Normal conditions are the same, non-morphous cells are in contact with KRAS cells, and KRAS cells are in contact with their own areas. One party's LND is the same under DPD treatment, the non-morphological change cells are retreating and moving, the inhibition is suppressed, and the original place is the same as the original one. As a result of the inhibition of cell movement, KRAS appears and blocks the appearance of large cell blocks.

项目成果

正常-がん細胞間相互作用を制御する化合物のスクリーニングとその機能解析

筛选控制正常癌细胞相互作用的化合物及其功能分析

• 发表时间: 2022
• 作者: 青山愛;平野弘之;渡邉信元;長田裕之;仙波憲太郎
• 通讯作者: 仙波憲太郎

ドーパミン拮抗薬ドンペリドンは受容体非依存的にがん細胞の拡大を抑制する

多巴胺拮抗剂多潘立酮以不依赖受体的方式抑制癌细胞扩张

• 发表时间: 2022
• 作者: 青山愛;平野弘之;渡邉信元;長田裕之;仙波憲太郎
• 通讯作者: 仙波憲太郎

A dopamine D2 receptor antagonist suppresses oncogenic focus formation in a receptor-independent manner

多巴胺 D2 受体拮抗剂以不依赖受体的方式抑制致癌灶形成

• 发表时间: 2021
• 作者: 青山愛;藤元次郎;平野弘之;渡邉信元;長田裕之;仙波憲太郎
• 通讯作者: 仙波憲太郎