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放線菌シグナル分子制御系の統合的解明および休眠二次代謝活性化への展開

放线菌信号分子控制系统的综合阐明及其在激活休眠次生代谢中的应用

基本信息

批准号：
21J14499
负责人：
見崎裕也
金额：
$ 0.96万
依托单位：
Hiroshima University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-28 至 2023-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21J14499/
关键词：
放線菌二次代謝産物二次代謝制御シグナル分子 SARP 活性化因子

项目摘要

放線菌Streptomyes rocheiは35個の二次代謝産物生合成遺伝子クラスターを保有しているが、そのうち大多数の二次代謝産物は未同定である。理由としては、生産収量が低いため検出できていない、培地条件により化合物生産に至っていない、生合成遺伝子の欠損、など様々な理由が想定される。そこで、本研究課題では、制御遺伝子の改変により、転写レベルで生合成遺伝子クラスターを活性化することを試みた。標的遺伝子として、転写抑制を担うシグナル分子レセプターホモログ、活性化を担うSARP型活性化因子に注目し、研究を遂行した。本年度は特に後者の活性因子に注力した。昨年度の研究により、Streptomyces rocheiの染色体上に存在するSARP型活性化因子SRO_3163を過剰発現させることで、親株には見られない新奇代謝産物YM3163-Aの生産が誘導されることを見いだした。SARP型活性化因子SRO_3163遺伝子は二次代謝産物生合成遺伝子クラスターに内包されておらず、グローバルな活性化因子として機能する可能性が示唆された。そこで、コントロール株(空ベクターを保持)と、SRO_3163過剰発現株の転写発現を解析することにより、YM3163-A生合成遺伝子クラスターを特定することを試みた。両菌株のRNAを抽出し、RNA-seq解析を行なった。その結果、複数の生合成遺伝子クラスターにおいて顕著な変化が見られ、単一の生合成遺伝子クラスターに絞り混むことが困難であった。

The actinomycete Streptomyes rochei produces 35 secondary metabolites and synthesizes the remaining secondary metabolites. The reasons are: low production yield, low production yield, low production yield, low production yield, and soil conditions: chemical combination The reason for the production of things, the lack of production and synthesis, and the reasons for the creation and synthesis of things.そこで, the subject of this research is では, the control legacy 伝子の礉変により, 転WRITE レベルで生 synthesize 缝子クラスターをactivation することをtest みた. The target remains the target, the inhibitory molecule is the molecule, the activating factor is the SARP-type activating factor, and the research is carried out. This year's special focus is on the latter's active factors. Last year's research, により, Streptomyces The SARP-type activating factor SRO_3163 is present on Rochei's chromosomes.とで, parent strain には见られないThe novel metabolite YM3163-A is produced and induced されることを见いだした. SARP-type activating factor SRO_3163 缝子は Secondary metabolite production and synthesis 缝子クラスタIt contains されておらず, グローバルな activating factor and として function and possibility.そこで、コントロール strains (empty ベクターをKEEP) と、SRO_3163 国簰発市の転写発现することにより、YM3163-A biosynthesis クラスターをSpecific することをtestみた.両The strain's RNA is extracted and the RNA-seq analysis is carried out.そのRESULT, plural の生生综合性伝子クラスターにおいて顕之な変化が见られ, 単一の生生成缝子クラスターに竊合むことが的狠であった.