世界初の脂質代謝改善ジペプチドの発見を基盤とするペプチド研究の革新的展開

基于全球首个改善脂质代谢二肽的发现，肽研究创新发展

• 批准号: 21J14848
• 负责人: 坂野 新太
• 金额: $ 0.96万
• 依托单位: Gifu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-28 至 2023-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21J14848/
• 关键词: PepT1; LC-TOF/MS; 体内吸収; PPARα; CYP7A1; 細胞内コレステロール; HepG2; AlphaFold2; ジペプチド; 血中定量; 門脈; HepG2細胞; 脂質蓄積モデル

これまで、Phe-Pro (FP) はコレステロール (CHOL) 代謝を改善する作用を有することを、PepT1欠損マウスへの経口投与試験 (600 mg/kg/day) で明らかにしてきた。他方、摂取後のFPの生体内での作用機序については不明のままであった。昨年度は、Wistar系雄ラット (11週齢) にFPを単回経口投与 (600 mg/kg) し、門脈採血をおこなった。その後、AccQ Tagアミン誘導体化LC-TOF/MS法 (内標準：[13C9,15N1] FP) により血中濃度を測定し、FPが0.485 nmol/mL-plasma存在することを判明し体内吸収性を証明した。そこで、今年度はこれらの濃度をベースに、HepG2細胞でCHOL代謝改善作用の影響を評価した。1.生理的血中濃度FPはCHOL蓄積を抑制する血中濃度レベルでHepG2細胞に対するFP添加の影響を検討したところ、0.485 nmol/mL濃度のFP添加によって細胞内CHOL濃度は有意に低下し、CHOL分解系律速酵素であるCYP7A1やPPARα mRNAレベルは有意に増加した。FPの構成アミノ酸混合物（F + P)では低下作用は認められなかった。また、PPARαアンタゴニスト存在下でFPの作用が消失したことから、FPはPPARα刺激を介して作用発現していると推察された。2.FPはPPARαの新規リガンドであるAlphaFold2を用いたin silico解析によって、FPを含む132種類のジペプチドにPPARαとの相互作用が認められ、PPARαのリガンド候補となりうることが示された。以上より、FPはPPARαのリガンドとして作用し、肝臓においてCHOL代謝を改善する作用を有するペプチド体であることが示された。

こ れ ま で, Phe - Pro (FP) は コ レ ス テ ロ ー ル を (CHOL) metabolism improve す を る is す る こ と を, PepT1 owe damage マ ウ ス へ の 経 mouth cast and test (600 mg/kg/day) で Ming ら か に し て き た. The mechanism of action of で <s:1> in the body of the other party, 摂, 摂, て, て is unknown, and ままであった. Yesterday's annual は, Wistar male ラ ッ ト (11 weeks 齢) に FP を 単 経 mouth cast back and し (600 mg/kg), portal blood を お こ な っ た. , after そ の AccQ Tag ア ミ ン inductor change LC - TOF/MS method (within standard: [13 c9, 15 n1] FP) に よ り blood concentration determination を し, FP が nmol/mL - 0.485 plasma exist す る こ と を.at し 収 absorption in vivo を prove し た. そ こ で, our は "こ れ ら の concentration を ベ ー ス に, HepG2 cells で CHOL, metabolic improvement の を appraisal of 価 し た. 1. Physiological concentrations in the blood of the FP は CHOL accumulation を inhibit す る blood levels レ ベ ル で HepG2 cells に す seaborne る FP add の influence を beg し 検 た と こ ろ, 0.485 At a concentration of nmol/mL, the addition of <s:1> FP intentionally led to a に decrease in the intracellular CHOL concentration に, and the であるCYP7A1やPPARα mRNAレベ た and た intentionally led to a に increase in the た of chol-decomposing ryotinase である. FP <s:1> constitutes a ア, ア, ノ acid mixture (F + P), で, <s:1>, and has a low effect, ノ, and められな, った. ま た, PPAR alpha ア ン タ ゴ ニ ス ト で in the presence of FP disappear の role が し た こ と か ら, FP は PPAR alpha stimulus を interface し て role 発 now し て い る と push examine さ れ た. 2. The FP は PPAR alpha の new rules リ ガ ン ド で あ る AlphaFold2 を with い た in silico parsing に よ っ て, FP を contains む 132 kinds の ジ ペ プ チ ド に PPAR alpha と の interaction が recognize め ら れ, PPAR alpha の リ ガ ン ド alternate と な り う る こ と が shown さ れ た. Above よ り, FP は PPAR alpha の リ ガ ン ド と し て role is crucial し, liver に お い て CHOL, improve を metabolic す を る is す る ペ プ チ ド body で あ る こ と が shown さ れ た.

项目成果

生理的血中濃度のFP (フェニルアラニン-プロリン) は、肝臓細胞HepG2においてコレステロール代謝を改善する

FP（苯丙氨酸-脯氨酸）的生理性血液浓度可改善肝细胞 HepG2 中的胆固醇代谢

• 发表时间: 2022
• 作者: 渋谷美和;坂野 新太，山本 真子，マヘムティ ミジティ，竹内 朝陽，葉 宇陽，小田 夏暉，西野 七海，海老原 章郎，長岡 利
• 通讯作者: 坂野 新太，山本 真子，マヘムティ ミジティ，竹内 朝陽，葉 宇陽，小田 夏暉，西野 七海，海老原 章郎，長岡 利

Dipeptide FP(Phe-Pro) improves cholesterol metabolism via PepT1 and appears in portal blood

二肽 FP(Phe-Pro) 通过 PepT1 改善胆固醇代谢并出现在门静脉血中

• 发表时间: 2022
• 作者: Arata Banno;Mako Yamamoto;Ryosuke;Mori;Jilite Wang;Maihemuti Mijiti;Asahi Takeuchi;Ye Yuyang;Satoshi Nagaoka.
• 通讯作者: Satoshi Nagaoka.

食品由来の機能性ペプチド研究の歩み及び脂質代謝改善ペプチド

食品源性功能肽研究及脂质代谢改善肽的历史

• 发表时间: 2022
• 期刊: アミノ酸研究
• 作者: Miwa Shibuya;長岡 利＊，竹内朝陽，マヘムティ ミジティ，坂野新太（＊責任著者）
• 通讯作者: 長岡 利＊，竹内朝陽，マヘムティ ミジティ，坂野新太（＊責任著者）

生理的血中濃度のFP (Phe-Pro) は、肝臓細胞HepG2においてコレステロール代謝を改善する

FP (Phe-Pro) 的生理血浓度可改善肝细胞 HepG2 中的胆固醇代谢

• 发表时间: 2022
• 作者: 坂野 新太;山本 真子;西野 七海;マヘムティ ミジティ;竹内 朝陽;葉 宇陽;小田 夏暉;海老原 章郎;長岡 利
• 通讯作者: 長岡 利

The physiological blood concentration of phenylalanine-proline can ameliorate cholesterol metabolism in HepG2 cells.

苯丙氨酸脯氨酸的生理血液浓度可以改善HepG2细胞中的胆固醇代谢。

• DOI: 10.1093/bbb/zbac167
• 发表时间: 2023
• 期刊: Biosci. Biotechnol. Biochem.
• 作者: Banno;A.;Yamamoto;M.;Mijiti;M.;Takeuchi;A.;Ye;Y.;Oda;N.;Nishino;N.;Ebihara;A.; Nagaoka;S.:
• 通讯作者: S.: