权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

放線菌における薬剤耐性変異の特性解析と抗生物質探索への応用

放线菌耐药突变的表征及其在抗生素搜索中的应用

基本信息

批准号：
21J15547
负责人：
星野颯
金额：
$ 0.96万
依托单位：
Shizuoka University (2022)Shinshu University (2021)
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-28 至 2023-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

放線菌がオフロキサシン耐性変異を獲得すると、抗生物質生産などの二次代謝が活性化することがある。本研究では放線菌を用い、オフロキサシン耐性変異の新たな特性を明らかにし、それを抗生物質探索に応用することを目的とした。令和4年度における研究実施状況を以下に示す。課題A：オフロキサシン耐性変異を活用した抗生物質探索静岡県駿河湾の海砂より分離したStreptomyces sp. OYST14株には、ゲノム情報よりペプチド系抗菌物質の生産能が示唆されていた。OYST14から、オフロキサシン耐性株を110株取得し、それらの代謝産物をHPLCおよびESI-MSにより調べた。その結果、ハロゲナーゼ遺伝子を含むNRPS遺伝子クラスターから生産される塩素化ペプチド、ランチペプチド生合成遺伝子クラスターから生産されるペプチド、それぞれの高生産株の取得に成功した。以上より、オフロキサシン耐性株の取得は、放線菌におけるペプチド系化合物の生合成の活性化にも有効であり、新規有用化合物の発見への有効なアプローチであることが強く示唆された。課題B：オフロキサシン耐性変異が放線菌に与える影響の解析Streptomyces coelicolor A3(2)において、オフロキサシン耐性を示すTetR遺伝子変異株およびRNAヘリカーゼ遺伝子変異株のRNA-seqを行い、各変異のオフロキサシン耐性化と二次代謝活性化への影響を調べた。その結果、TetR変異では、オフロキサシン耐性化は薬剤排出機構および活性酸素種の分解経路の発現上昇に起因し、二次代謝活性化は翻訳関連遺伝子の発現増加に起因することが示唆された。またRNAヘリカーゼ変異では、オフロキサシン耐性化はTetR変異と同様に、薬剤排出機構および活性酸素種の分解経路の発現上昇に起因し、二次代謝活性化はATP合成系の発現増加に起因することが示唆された。

The bacteria were isolated from the bacteria, the tolerance was tested, and the antimicrobial agents were used for the second generation. In this study, we studied the use of bacteria, bacteria, tolerance, new characteristics, antimicrobials, antimicrobials, and objectives. The following is an indication of the situation of the annual study of Ling he in the year 4. Topic A: the purpose of this study is to explore the separation of marine sand in the bay of the river by using the anti-biological agent to explore the Streptomyces sp. The antibiotics of OYST14 strain were sensitive to bacterial infection, and the antimicrobial agents could not be detected. One hundred and ten tolerant plants were obtained from OYST14 strains, and HPLC strains were obtained from ESI-MS strains. The results showed that the results of this study showed that the results of the study showed that the children of the NRPS family had the highest levels of protein and protein, and that the synthesis of genes was successful. The above compounds have been obtained from tolerant strains, isolated from bacteria and isolated from bacteria. Active compounds have been synthesized, and useful compounds with new rules have been synthesized. Topic B: the analysis of Streptomyces coelicolor A3 (2) isolates, RNA tolerance tests and RNA-seq tolerance tests showed that there was a significant difference between the two groups in terms of tolerance, tolerance and tolerance. The results of the experiment, the results of the TetR test, the results of the results, the results of the test, the results of the test, the results of the results, the In the RNA system, the tolerance of TetR is the same as that of the active acid decomposition pathways, and the secondary activation of the ATP synthesis system shows that the cause is the same as that of the active acid.