ヒトiPS細胞に有効で熱安定性の高い環状ペプチド型bFGF代替物の創製

创造对人类 iPS 细胞有效且具有高热稳定性的环肽型 bFGF 替代品

基本信息

批准号：
21K04785
负责人：
黒澤尋
金额：
$ 2.66万
依托单位：
University of Yamanashi
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2023-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

塩基性線維芽細胞増殖因子（bFGF）は、ヒトiPS細胞の未分化性維持と増殖のために必須の因子である。Ｒ３年度においては、bFGF受容体（FGFR1c）に特異的に結合する環状ペプチド「cpep-bFGF1c」のbFGF様活性（アゴニスト活性）について検討した。「cpep-bFGF1c」のアゴニスト活性は二量体化により向上したが、その活性レベルは未分化維持の観点からは不十分であった。Ｒ４年度は、FGFR2c結合型環状ペプチド「cpep-bFGF2c」のアゴニスト活性について検討を行った。さらに、「cpep-bFGF2c」のホモ二量体、及び「cpep-bFGF1c」と「cpep-bFGF2c」のヘテロ二量体を調製し、同様にヒトiPS細胞の未分化培養系に適用してbFGF様活性を評価した。FGFR2c結合型環状ペプチド「cpep-bFGF2c」の単量体は、二量体化したFGFR1c結合型環状ペプチド「cpep-bFGF1c」よりも高いbFGF様活性を示した。そこで、さらなる活性の向上を期待して、「cpep-bFGF2c」を二量体化してiPS細胞に適用したが、iPS細胞の未分化増殖は促進されず、むしろbFGF様活性は低下した。（1）FGFR2c結合型環状ペプチド「cpep-bFGF2c」の単量体は、これまでで最も高いアゴニスト活性を示し、iPS細胞の未分化増殖を維持することが判明した。（2）FGFR1c結合型環状ペプチド「cpep-bFGF1c」は二量体化するとアゴニスト活性を向上させるが、「cpep-bFGF2c」では二量体化の効果は得られなかった。（3）結合型環状ペプチドのアゴニスト活性を高い順に並べると次のようになる。「cpep-bFGF2c」単量体＞「cpep-bFGF2c」二量体＞「cpep-bFGF1c」二量体＞「cpep-bFGF1c」単量体

碱性成纤维细胞生长因子（BFGF）是维持和增殖人IPS细胞的重要因素。在R3中，研究了环状肽“ CPEP-BFGF1C”的BFGF样活性（激动剂活性），该活性专门与BFGF受体（FGFR1C）结合。二聚化改善了“ CPEP-BFGF1C”的激动剂活性，但是从维持不分化的角度来看，活动水平不足。在2014财年，研究了FGFR2C连接环状肽“ CPEP-BFGF2C”的激动剂活性。此外，制备了“ CPEP-BFGF2C”的同二聚体以及“ CPEP-BFGF1C”和“ CPEP-BFGF2C”的异二聚体，并类似地应用于人IPS细胞的未分化培养系统中，以评估BFGF类似BFGF的活性。 FGFR2C连接的环状肽“ CPEP-BFGF2C”的单体显示出比二聚FGFR1C-链接环状肽“ CPEP-BFGF1C”更高的BFGF样活性。因此，为了希望进一步改善活性，通过二聚化将CPEP-BFGF2C应用于IPS细胞，但没有促进IPS细胞的未分化增殖，并降低了BFGF样活性。（1）已发现FGFR2C连接的环状肽“ CPEP-BFGF2C”的单体表现出迄今为止最高的激动剂活性，并维持IPS细胞的未分化的增殖。（2）FGFR1C连接的环状肽“ CPEP-BFGF1C”在二聚体时改善了激动剂活性，但没有使用“ CPEP-BFGF2C”获得二聚化的效果。（3）结合环状肽的激动剂活性按以下方式排序。 “ CPEP-BFGF2C”单体>“ CPEP-BFGF2C” DIMER>“ CPEP-BFGF1C” DIMER>“ CPEP-BFGF1C”单体

项目成果

期刊论文数量（1）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Novel cyclic N-alkyl peptides as bFGF Mimetics to Maintain the Pluripotency of Human Induced Pluripotent Stem Cells

新型环状 N-烷基肽作为 bFGF 模拟物，维持人类诱导多能干细胞的多能性

DOI：
发表时间：
2021
期刊：
影响因子：
0
作者：
Masashi Sato;Hiromi Tanaka;Yoshitsugu Ohnuki;Shinji Masui;Takashi Kawakami and Hiroshi Kurosawa
通讯作者：
Takashi Kawakami and Hiroshi Kurosawa