カビと光の関係ー真菌類の光感知が導く分化誘導制御機構の解明に向けた基盤構築

真菌与光的关系：为阐明真菌光传感引导的分化诱导控制机制奠定基础

• 批准号: 21K05339
• 负责人: 伏見 圭司
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Kobe University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K05339/
• 关键词: 光制御機構; 光受容体; 光感知; UV-Vis スペクトル; 真菌類（カビ・キノコ）; 生活環; 分化誘導; 子実体形成; フィトクロム; ビリン色素; 真菌類; 生体分子; 分化誘導制御機構

カビ（Aspergillus nidulans（モデルカビ、An）、A. oryzae（コウジカビ、Ao））およびキノコ（Coprinopsis cinerea（ウシグソヒトヨタケ、Cc）、Schizophyllum commune（スエヒロタケ、Sc））に由来する光受容体・フィトクロム（FphA）の遺伝子を His-tag 融合タンパク質として発現させるために、pET28a ベクターに導入した。取得したプラスミド DNA をビリン色素合成系を保有する大腸菌内で発現後、アフィニティーカラムクロマトグラフィーによる精製を行い、UV-Vis 分光光度計による吸収波長特性の解析を試みた。AnFphA および AoFphA は赤色光 / 遠赤色光感知型光受容体として機能することを確認できたが、CcFphA および ScFphA については発現がみられず、その機能を確認することができなかった。そこで、alphafold2 によって各光受容体の分子モデリングを行い、立体構造を形成しない N-末端側の可変領域を除去したコンストラクトを作製した。現在、再度、分光光度計による吸収波長特性の解析を試みている。一方、モデルキノコであるウシグソヒトヨタケのゲノムには、光感知機能をもつ遺伝子（CcPhotolyase、CcDst-1、CcDst-2、CcWC2）がアノテーションされていた。先行研究において、これらの遺伝子破壊株は子実体を正常に形成できないことが報告されているが、その分光学的な解析は行われていなかった。加えて、CcFphA と子実体形成を紐付ける遺伝学的な研究報告はなかった。現在、カビ、キノコに由来する各 FphA だけでなく、モデルキノコであるウシグソヒトヨタケの CcPhotolyase、CcDst-1、CcDst-2、CcWC2 にも焦点を当てた解析を進めている。

Youdaoplaceholder0 (Aspergillus nidulans (モデ モデ カビ カビ, An), A. oryzae (コウジカビ, Ao)) およびキノコ (Coprinopsis cinerea (ウシグソヒトヨタケ, Cc), Schizophyllum Commune (ス エ ヒ ロ タ ケ, Sc)) に origin す る light by let body · フ ィ ト ク ロ ム (FphA) の heritage 伝 を His son - tag fusion タ ン パ ク qualitative と し て 発 now さ せ る た め に, pET28a ベ ク タ ー に import し た. Obtain し た プ ラ ス ミ ド DNA を ビ リ ン pigment GeChengXi を retain す る coliform in で 発 presently after, ア フ ィ ニ テ ィ ー カ ラ ム ク ロ マ ト グ ラ フ ィ ー に よ る refined を line い, UV - Vis spectrophotometer に よ る 収 absorption wavelength characteristic analytical を の try み た. AnFphA お よ び AoFphA は red light/far red light perception type light being let body と し て function す る こ と を confirm で き た が, CcFphA お よ び ScFphA に つ い て は 発 now が み ら れ ず, そ の function を confirm す る こ と が で き な か っ た. そ こ で, alphafold2 に よ っ て each ray by let body の molecular モ デ リ ン グ を い, three-dimensional structure を form し な い N - terminal side の を - field to remove し た コ ン ス ト ラ ク ト を cropping し た. Now, again, the wavelength characteristics of the による absorption wavelength of the spectrophotometer による analysis を try みて による る る. One party, モ デ ル キ ノ コ で あ る ウ シ グ ソ ヒ ト ヨ タ ケ の ゲ ノ ム に は, light perception function を も つ heritage 伝 child (CcPhotolyase, CcDst - 1, 2, CcWC2 CcDst -) が ア ノ テ ー シ ョ ン さ れ て い た. Leading research に お い て, こ れ ら の heritage 伝 child broken 壊 strains は を normal に be body formation で き な い こ と が report さ れ て い る が, そ の points of optical line analytical は な わ れ て い な か っ た. The な research report on を ける heritage 伝 formed by adding えて and CcFphA と subbodies, な な った った. Now, カ ビ, キ ノ コ に origin す る each FphA だ け で な く, モ デ ル キ ノ コ で あ る ウ シ グ ソ ヒ ト ヨ タ ケ の CcPhotolyase, CcDst - 1, 2, CcWC2 CcDst - に も focus を when て た parsing を into め て い る.