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カビと光の関係ー真菌類の光感知が導く分化誘導制御機構の解明に向けた基盤構築

真菌与光的关系：为阐明真菌光传感引导的分化诱导控制机制奠定基础

基本信息

批准号：
21K05339
负责人：
伏見圭司
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Kobe University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

カビ（Aspergillus nidulans（モデルカビ、An）、A. oryzae（コウジカビ、Ao））およびキノコ（Coprinopsis cinerea（ウシグソヒトヨタケ、Cc）、Schizophyllum commune（スエヒロタケ、Sc））に由来する光受容体・フィトクロム（FphA）の遺伝子を His-tag 融合タンパク質として発現させるために、pET28a ベクターに導入した。取得したプラスミド DNA をビリン色素合成系を保有する大腸菌内で発現後、アフィニティーカラムクロマトグラフィーによる精製を行い、UV-Vis 分光光度計による吸収波長特性の解析を試みた。AnFphA および AoFphA は赤色光 / 遠赤色光感知型光受容体として機能することを確認できたが、CcFphA および ScFphA については発現がみられず、その機能を確認することができなかった。そこで、alphafold2 によって各光受容体の分子モデリングを行い、立体構造を形成しない N-末端側の可変領域を除去したコンストラクトを作製した。現在、再度、分光光度計による吸収波長特性の解析を試みている。一方、モデルキノコであるウシグソヒトヨタケのゲノムには、光感知機能をもつ遺伝子（CcPhotolyase、CcDst-1、CcDst-2、CcWC2）がアノテーションされていた。先行研究において、これらの遺伝子破壊株は子実体を正常に形成できないことが報告されているが、その分光学的な解析は行われていなかった。加えて、CcFphA と子実体形成を紐付ける遺伝学的な研究報告はなかった。現在、カビ、キノコに由来する各 FphA だけでなく、モデルキノコであるウシグソヒトヨタケの CcPhotolyase、CcDst-1、CcDst-2、CcWC2 にも焦点を当てた解析を進めている。

Aspergillus nidulans (モデルカビ, An), A. oryzae (コウジカビ, Ao)) Coprinopsis cinerea (ウシグソヒトヨタケ, Cc), Schizophyllum commune (スエヒロタケ, Sc)) The origin of the photoreceptor・フィトクロム (FphA) no legacy His-tag fusion of タンパク性として発appears させるために, pET28a ベクターに imported した. Acquire したプラスミド DNA The pigment synthesis system of をビリリをmaintains the presence of する coliform bacteria, アフィニテUV-Vis Analysis of absorption wavelength characteristics using a spectrophotometer. AnFphA および AoFphA はRed light / Far red light sensing type photoreceptor として Function することをConfirmation できたが, CcFphA および ScFphAについては発appears がみられず, and そのfunction をconfirms することができなかった.そこで, alphafold2 によってEach photoreceptor molecule モデリングを行い, three-dimensional structure しないThe area on the N-terminal side can be removed by removing the N-terminal side. Now, once again, let's try the analysis of absorption wavelength characteristics using a spectrophotometer. One side, モデルキノコであるウシグソヒトヨタケのゲノムには, light sensing function をもつ伝子 (CcPh otolyase, CcDst-1, CcDst-2, CcWC2) がアノテーションされていた. First study on the において, これらの伝子波壊区は子実体を Normal できないことが report されているが, そのspectroscopy analysis は行われていなかった. A research report on the formation of CcFphA and the body formation of the new body. Now, カビ, キノコに来するeach FphA だけでなく, モデルキノコであるウシグソヒトヨタケのCcPhotolyase, CcDst-1, CcDst-2, CcWC2 にもfocus をwhen てたanalyze を进めている.