キク花芽分化の日長応答性を決定するアンチフロリゲン遺伝子の発現調節機構の解明

阐明决定菊花花芽分化光周期响应的抗成花基因表达调控机制

基本信息

项目摘要

短日植物であるキクの光周性花成を制御する鍵遺伝子である「アンチフロリゲン」について、日長応答性を担う遺伝子上流の発現調節領域に着目し、その発現機構を明らかにする。長日条件のキクの葉においてアンチフロリゲンの発現が誘導される機構を明らかにすることで新規な学術的知見となり、ひいては実用技術の提案が可能となる。本応募課題ではAFT遺伝子近傍の日長応答配列の同定と、それに作用し発現を制御する転写因子の解明に取り組み、光周性花成の理解を深めることを目的とする。昨年度にAFT遺伝子上流領域の2700塩基のうち、2か所(それぞれ約100塩基)が日長応答に必要であることを明らかにしている(未発表)。R4年度はAFT遺伝子上流領域の欠損部位をずらし、レポーターとしてGUS遺伝子に融合させた組換え体を7コンストラクト、各10系統程度を作出した。レポーターとしたGUS遺伝子の日長応答性をqRT-PCRで解析した。2か所あるそれぞれの応答領域について40塩基程度にまで絞り込み、領域内の転写因子の結合候補部位の探索を行った。それぞれの応答領域を2反復、もしくは3反復で組み込んだ酵母とキクcDNAを用いてワンハイブリッドスクリーニングを実施した。約200万のキクcDNAライブラリから応答領域に結合する可能性のある遺伝子断片を保持する組換えコロニーを50程度取得し、シーケンス解析のためのプラスミド単離を行った。
In short-day plants, the photoperiod flowers are used to control the temperature, the temperature and the temperature. Over a long period of time, it has been known that the leading agencies are aware of the knowledge of new regulations and technologies, and that the proposals for the use of technologies may not be successful. In this fund-raising project, the recent days of the AFT program should be listed in the same column, the role of the system can be used to control the writing factors of the system, and the photoperiod will be used to understand the purpose of the system. In the last year, 2700 yuan in the upper-class field of the AFT company and 2 percent of the company (about 100 million dollars) replied that it was necessary to make sure that the information was not shown in the table. In R4, the upper-level parts of the AFT system, such as the high-level location, the GUS system, and the system level of each 10 system level, will be integrated. You will need to learn more about the number of days in which you are GUS. You will be able to analyze qRT-PCR in response. 2. In the field of information, you should answer the information of the 40 basic level of the field, and the exploration of the candidate position in the combination of the writing factor in the field. In response to the field response, the yeast cDNA system was used to determine whether the yeast was used to treat the disease. About 2 million percent of the total number of cDNA data is available in the field combined with the possibility that the sub-fragment is used to maintain the accuracy of the system.

项目成果

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