植物葉面細菌の6型分泌系を利用した植物細菌病害の防除技術の開発に資する基盤構築

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昨年度までに、アブラナ科植物の葉面より細菌を分離し、分離株の中からアブラナ科黒腐病菌（Xanthomonas campestris pv. campestris: Xcc)の発光変異株と寒天培地上で混合培養するとXcc由来の発光がほとんど観察されなくなる、すなわち、Xccの増殖を抑制すると推測される株をいくつか選抜していた。また、葉面細菌の選抜株をXccと宿主ハクサイに混合接種したところ、Xcc単独接種時と比べて発病が抑制されることを確認していた。本年度は、まず、昨年度までに選抜していた葉面細菌がXccの増殖を抑制するかを確認するために、抗生物質耐性に基づいた細菌間競合試験を行った。テトラサイクリン耐性のXcc発光変異株と同抗生物質に対して感受性の葉面細菌を抗生物質無添加の寒天培地上で一晩培養後に生育してきた細菌コロニーを滅菌生理食塩水で懸濁し、段階希釈したものをテトラサイクリン添加培地に滴下し、一晩培養後の細菌の生育を確認した。その結果、Xccは葉面細菌と混合培養後においても、単独培養時と同程度の生育を示し、選抜していた葉面細菌は当初の期待に反してXccの増殖を抑制しないことが明らかとなった。一方で、選抜していた葉面細菌のうちの1株（Mi1-2A）は、Xccと同様にアブラナ科植物を宿主とするアブラナ科黒斑細菌病菌（Pseudomonas syringae pv. alisalensis: Pcal）や6型分泌系を介した細菌間競合試験において獲物細胞(prey株)として用いられる大腸菌DH5α株の増殖を抑制することが確認された。Mi1-2A株の全ゲノム解析を行ったところ、6型分泌系をコードする遺伝子クラスターを有することが確認された。そこで、次年度は、Mi1-2A株がアブラナ科黒斑細菌病の抑制効果を有するかを調査するとともに、6型分泌系との関連を検討することとした。