魚病ウイルスVLPワクチン開発とそれを足場としたワクチン分子設計の技術基盤構築

鱼病病毒VLP疫苗的研制及以此为支架的疫苗分子设计技术基础的构建

• 批准号: 21K05728
• 负责人: 玉城 志博
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: University of the Ryukyus
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K05728/
• 关键词: 魚病ワクチン; 魚病ウイルス; ウイルス様粒子（VLPs）; 分子設計; 分子足場（scaffold）; 足場（scaffold）

魚病ウイルス（特許申請前につきウイルス名は秘匿としています）に対して、大腸菌発現によるウイルス様粒子（Virus-like particles: VLPs）ワクチンを開発する。現行の魚病ワクチンの多くは不活化ワクチンであり、ウイルスを株化細胞等で増殖させ、ホルマリン等で不活化するため高価になりがちである。しかし、我々が開発中のVLPsワクチンは、大腸菌発現系で大量に製造可能なため、製造コストを大幅に抑えることができ、これまでコスト的な問題で適応が難しかった多くの魚病ウイルス感染症や海外での使用拡大も可能となる。令和４年度は、VLPs抗原ならびに発現レベルが向上した分子改変VLPs抗原のワクチン効果を検証した。すなわち、これら２種類のVLPs抗原を試験魚へ投与し、その抗原特異的抗体価を測定したところ、優位に高い抗体価が誘導されていることが分かった。また、病原性ウイルス株を用いた攻撃試験を実施したところ、優位に高いワクチン効果を示した。また、前記VLPs抗原の分子構造的特性に着目し、本来VLPs形成が困難な他の魚病ウイルス抗原を前記VLPs抗原表層上に提示した粒子状構造（「疑似ウイルス様粒子（Pseudovirus-like particles: PVLPs）」）の開発において令和３年度に抗原コンストラクトを構築したので、令和４年度はこのコンストラクトを用いて大腸菌で発現させ、その生化学的解析を実施した。その結果、PVLPは大腸菌で可溶性発現し、発現した抗原を精製後に電子顕微鏡で撮影したところ、VLPsを形成していることが分かった。

Fish disease virus (virus like particles: VLPs) Many of the fish diseases are not activated, such as cell proliferation, cell proliferation, and cell proliferation. VLPs under development are expected to produce large quantities of E. coli, which can be used in large quantities. In 2004, VLPs antigen discovery and molecular modification of VLPs antigen discovery results were identified. Two kinds of VLPs were tested and antigen-specific antibodies were detected. The pathogen is used to attack the virus, and the virus is used to attack the virus The characteristics of molecular structure of VLPs antigens are noted above. It is difficult to form VLPs in nature. The surface layer of VLPs antigens is indicated above.("Pseudovirus-like particles: PVLPs") was developed in 2003 and 2004, and the development of E. coli and biochemical analysis were carried out in 2003 and 2004. The results showed that PVLP was soluble in E. coli, and the antigen was purified by electron microscopy, and VLPs were formed.

项目成果

Highly efficient protein expression of Plasmodium vivax surface antigen, Pvs25, by silkworm and its biochemical analysis.

家蚕高效表达间日疟原虫表面抗原 Pvs25 蛋白及其生化分析。

• DOI: 10.1016/j.pep.2022.106096
• 发表时间: 2022
• 期刊: Protein Expression and Purification
• 影响因子: 1.6
• 作者: Miyata T;Minamihata K;Kurihara K;Kamizuru Y;Gotanda M;Obayashi M;Kitagawa T;Sato K;Kimura M;Oyama K;Ikeda Y;Tamaki Y;Lee JM;Sakao K;Hamanaka D;Kusakabe T;Tachibana M;Ibrahim HR
• 通讯作者: Ibrahim HR