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低コストウニ用配合飼料の開発を目指した核内受容体COUP-TFのリガンドの特定

核受体COUP-TF配体的鉴定用于开发低成本海胆配合饲料

基本信息

批准号：
21K05778
负责人：
浦和寛
金额：
$ 2.75万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究の最終目標は、低コストウニ用配合飼料の開発を目指している。この最終目標を実現するために、本研究では、ウニ生殖巣の肥大に伴う栄養の合成・蓄積に最も関与している核内受容体COUP-TFのリガンドを特定することを第一目標とする。COUP-TFは、無脊椎動物から脊椎動物において存在し、タンパク質・糖・脂質類の合成を制御している。未だ生体内のリガンドは不明である。ウニ生殖巣の肥大時にタンパク質・糖・脂質類の合成・蓄積が核内受容体の制御によりなされている科学的根拠を基にして本研究で明らかにするCOUP-TFのリガンドを含む低コスト天然素材を用いウニ用配合飼料の設計に応用する。MYPプロモーター領域を組み込んだレポーターアッセイ系を構築し、ウニ生殖巣中の総脂質の中で活性の高い分画を得た。この分画に含まれる脂肪酸類を同定し、標準品を用いてレポーターアッセイ系によりリガンドの探索を行った。結果、活性の高い脂肪酸は同定できなかった。このことから、活性の高い分画を更に分画しながら活性の高い分画を得た後にレポーターアッセイ系を用いてリガンドの絞り込みが必要であることが明らかになった。これらの研究に加え、ウニ生殖巣中でMYPは、栄養細胞で合成されていることからウニ生殖巣の初代細胞培養系の構築を行った。この初代細胞培養系を用いながらレポーターアッセイ系と並行してリガンドの探索を予定している。現在、確立した初代細胞培養系は、長期間細胞が活性を持たないことが明らかになったことから、培養液、培養温度を検討する必要性が残された。

The ultimate goal of this study is to develop low-quality compound feeds.このFinal goal を実appear するために、This research では、ウニ Reproductive uterus のHypertrophy に companion う栄nurturing のSynthesis and accumulation にThe most important thing is the first target of COUP-TF's nuclear receptor COUP-TF. COUP-TF's existence, the existence of invertebrates and vertebrates, and the synthesis and control of substances, sugars, and lipids. The unidentified のリガンドは in the unborn body. The root of science is the control of the synthesis and accumulation of substances, sugars, and lipids in the hypertrophy of reproductive organs and the control of nuclear receptors. This study is based on the design of COUP-TF's natural materials with low natural ingredients and the use of compound feed. MYP's プロモーターfield み込んだレポーターアッセイ system を structure し, ウニ壣中の総lipid の中でActivity の高い分画を得た.この画にcontaining まれるfatty acid type を同定し, standard product いてレポーターアッセイ行によりリガンドのExploration を行った. As a result, the fatty acids with high activity are the same as those with high activity.このことから、Activity の高い分画を上に分画しながらActive の高い分画を得た后にレポThe ーターアッセイ system is made of いてリガンドの炊込みがnecessary であることが明らかになった.これらの Research に加え, ウニGenitogen medium MYP は, and trophic cell でsynthesis されていることからウニGenitasi のPrimary cell culture line construction を行った. The first-generation cell culture system was developed in parallel with the ANALYZE cell culture system. Now, we have established the primary cell culture system, the long-term cell viability, the maintenance of long-term cell viability, the culture medium, and the necessity of cultivating temperature.