低コストウニ用配合飼料の開発を目指した核内受容体COUP-TFのリガンドの特定

核受体COUP-TF配体的鉴定用于开发低成本海胆配合饲料

• 批准号: 21K05778
• 负责人: 浦 和寛
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K05778/
• 关键词: ウニ; 生殖巣; 核内受容体; COUP-TF; リガンド; レポーターアッセイ; 初代細胞培養系; 主要卵黄タンパク質; 養殖

本研究の最終目標は、低コストウニ用配合飼料の開発を目指している。この最終目標を実現するために、本研究では、ウニ生殖巣の肥大に伴う栄養の合成・蓄積に最も関与している核内受容体COUP-TFのリガンドを特定することを第一目標とする。COUP-TFは、無脊椎動物から脊椎動物において存在し、タンパク質・糖・脂質類の合成を制御している。未だ生体内のリガンドは不明である。ウニ生殖巣の肥大時にタンパク質・糖・脂質類の合成・蓄積が核内受容体の制御によりなされている科学的根拠を基にして本研究で明らかにするCOUP-TFのリガンドを含む低コスト天然素材を用いウニ用配合飼料の設計に応用する。MYPプロモーター領域を組み込んだレポーターアッセイ系を構築し、ウニ生殖巣中の総脂質の中で活性の高い分画を得た。この分画に含まれる脂肪酸類を同定し、標準品を用いてレポーターアッセイ系によりリガンドの探索を行った。結果、活性の高い脂肪酸は同定できなかった。このことから、活性の高い分画を更に分画しながら活性の高い分画を得た後にレポーターアッセイ系を用いてリガンドの絞り込みが必要であることが明らかになった。これらの研究に加え、ウニ生殖巣中でMYPは、栄養細胞で合成されていることからウニ生殖巣の初代細胞培養系の構築を行った。この初代細胞培養系を用いながらレポーターアッセイ系と並行してリガンドの探索を予定している。現在、確立した初代細胞培養系は、長期間細胞が活性を持たないことが明らかになったことから、培養液、培養温度を検討する必要性が残された。

The ultimate goal of this study is to use compound feed to develop を with the aim of <s:1> て る る る. こ の ultimate goal を be presently す る た め に, this study で は, ウ ニ reproductive 巣 の hypertrophy に with う tech students.their ownship, raise の synthetic accumulation に, most も masato and し て い る nuclear within the COUP - let body TF の リ ガ ン ド を specific す る こ と を first target と す る. COUP - TF は, invertebrates か ら vertebrate に お い て し, タ ン パ ク mass, sugar, lipid classes の synthetic を suppression し て い る. In a non-だ organism, there is a リガ ド ド リガ unknown である. ウ ニ reproductive 巣 の hypertrophy when に タ ン パ ク mass, sugar, lipid accumulation が nuclear class の synthesis, within the capacity of body の suppression に よ り な さ れ て い る scientific root 拠 を base に し て in this study で Ming ら か に す る COUP - TF の リ ガ ン ド を containing low む コ ス ト を natural material with い ウ ニ with compound feed の design に 応 with す る. MYP プ ロ モ ー タ ー field を group み 込 ん だ レ ポ ー タ ー ア ッ セ イ を build し, ウ ニ in reproductive 巣 の 総 lipid の の い points higher activity of で painting を た. こ の points draw に containing ま れ る fatty acid を with し, standard を い て レ ポ ー タ ー ア ッ セ イ department に よ り リ ガ ン ド の exploration line を っ た. As a result, the activity of <s:1> high <s:1> fatty acids <s:1> is determined to be で な な った った. こ の こ と か ら, active の high い paint を に points more し な が ら active の い points higher draw を た after に レ ポ ー タ ー ア ッ セ を イ department with い て リ ガ ン ド の ground り 込 み が necessary で あ る こ と が Ming ら か に な っ た. こ れ ら の research に え, ウ ニ reproductive 巣 で the MYP は, tech students.their ownship cells で synthetic さ れ て い る こ と か ら ウ ニ reproductive 巣 の early generation of cell culture is の line build を っ た. こ の original cell culture system を with い な が ら レ ポ ー タ ー ア ッ セ イ department と parallel し て リ ガ ン ド の explore を designated し て い る. Now, establish し た original cell culture system between は, long-term を が activity hold た な い こ と が Ming ら か に な っ た こ と か ら, culture medium, culture temperature を beg す 検 る necessity が residual さ れ た.