ウニ生殖巣における栄養細胞の生理機能解析

海胆性腺营养细胞的生理分析

• 批准号: 17780150
• 负责人: 浦 和寛
• 金额: $ 2.3万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17780150/
• 关键词: エゾバフンウニ; 卵巣; 精巣; 雌特異タンパク質; 栄養細胞; 主要卵黄タンパク質

北海道において経済的価値の高いウニは養殖事業の最適種の一つであり、ウニの種苗生産技術は、ほぼ確立さているものの、食品的価値の高いサイズまで効率的に飼育する中間育成技術の確立には至っていない。本研究では、ウニ類の新たな養殖技術に応用するための第一歩として、ウニ類の生殖生理学の基礎的知見の集積を目的としている。本年度では、エゾバフンウニをモデル生物とし、生殖巣の発達に関与するタンパク質の同定と遺伝子配列の決定を行った。多くの卵生動物では、卵黄中に個体発生に必要な栄養源として卵黄タンパク質を蓄積している。ウニ類においても卵黄タンパク質は存在するが、それらの機能などは詳細にされていない。ウニ類において興味深いのは、魚類では主要な卵黄タンパク質は雌特異的に存在するが、ウニ類においては雌雄生殖巣内に共通に存在することが知られている。本研究では、雌特異タンパク質として分子量約33kDaのタンパク質(YP33kDa)を免疫生化学手法により同定し、粗精製を行った後にN末端アミノ酸配列を解読した。解読したアミノ酸配列をもとにプライマーを作製し、RACE-PCR法によりcDNAのクローニングを行い、アミノ酸348残基をコードする全長1044bpのcDNAを得た。アミノ酸配列の解析の結果、脊椎動物の神経細胞に発現している細胞接着機能を有する。Fasciclinタンパク質と相同性を持っていた。これらのことから、YP33kDaは受精時の精子との細胞接着に関与している可能性が示唆された。次に、YP33kDaの遺伝子の発現解析を行った。YP33kDaについては、雌生殖巣のみで発現が認められた。これらの結果から、今回同定されたタンパク質はエゾバフンウニ生殖巣の発達機構解明のための分子マーカーとして有用であると示された。

Hokkaido culture values are high, and the establishment of intermediate breeding techniques for breeding the most suitable species for the breeding business is high. This study is the first step in the application of new breeding techniques and the aim of accumulating knowledge on the basis of reproductive physiology. This year, the development of biological, reproductive and genetic identity was determined. In many egg-laying animals, egg yolk is necessary for individual development and accumulation of egg yolk. It has a variety of functions, such as: In fish, egg yolk is the main component, and female is the main component. In this study, the protein with a molecular weight of about 33kDa (YP33kDa) was determined by immunochemical methods, and the N-terminal amino acid sequence was determined after crude purification. A cDNA fragment of 1044bp in length was obtained by RACE-PCR from the cDNA fragment of 348 residues. The results of acid alignment analysis, vertebrate neuronal development and cellular function are discussed. Fasciclin is the same as the original. The YP33kDa protein is associated with the cell cycle of sperm during fertilization. The analysis of protein expression of YP33kDa protein was carried out. YP33kDa The results of this study are as follows: