プラスチック生分解が引き金となる難分解添加剤放出による海洋環境汚染の加速評価基盤

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本研究では、生分解性プラスチックと同時に使用される人為起源の難分解性化学物質に着目し、基盤材料の生分解過程で放出されるこれらの分子の検出を可能とすることを目指して、実験室内でのモデル分解系の構築を行っている。昨年度に引き続き、生分解加速モデル系構築へ向けて、生分解性プラスチック分解酵素の取得を継続した。スクリーニングによりPHA分解活性が見られた菌株の持つバチルス属細菌のもつPoly(3-hydroxybutyrate) depolymeraseの発現コンストラクトを、大腸菌ベクター系を使って作成した。今後、関連酵素の枯草菌での組換えタンパク質生産を可能とするため、枯草菌での形質転換条件の検討を行った。また、複数の生分解性プラスチックの酵素分解物を海水で希釈した液をモデルサンプルとして、分解途中のオリゴマーを濃縮回収する条件を検討した。LCMSによる分離と検出条件の検討も併せて行った。pHや通水量、溶出溶媒の検討により希薄サンプルからのオリゴマー回収と検出も可能となった。逆相モードの固相抽出カラムによる濃縮回収では、脂溶性夾雑物が同時に濃縮され、今後微量分析の支障となることが懸念された。そこで始めに活性炭カラムを用いて脂溶性夾雑　物を除去する工程を追加したところ、汚染を軽減することができた。対象オリゴマーの極性が高い場合には本法は有効であったが、極性の低いオリゴマーの場合は活性炭カラムからの溶出が困難であった。本課題が対象とする添加物の場合も同様の課題が生じることが予想されることから分別条件の確立または選択的な検出法が必要と考えられる。