プラスチック生分解が引き金となる難分解添加剤放出による海洋環境汚染の加速評価基盤

塑料生物降解引发持久性添加剂释放造成海洋环境污染加速评估平台

• 批准号: 21K05870
• 负责人: 大田 ゆかり
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Gunma University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K05870/
• 关键词: 生分解性プラスチック; 難分解添加剤; 加速評価; 酵素; 海洋微生物; 添加剤; 海洋環境汚染

本研究では、生分解性プラスチックと同時に使用される人為起源の難分解性化学物質に着目し、基盤材料の生分解過程で放出されるこれらの分子の検出を可能とすることを目指して、実験室内でのモデル分解系の構築を行っている。昨年度に引き続き、生分解加速モデル系構築へ向けて、生分解性プラスチック分解酵素の取得を継続した。スクリーニングによりPHA分解活性が見られた菌株の持つバチルス属細菌のもつPoly(3-hydroxybutyrate) depolymeraseの発現コンストラクトを、大腸菌ベクター系を使って作成した。今後、関連酵素の枯草菌での組換えタンパク質生産を可能とするため、枯草菌での形質転換条件の検討を行った。また、複数の生分解性プラスチックの酵素分解物を海水で希釈した液をモデルサンプルとして、分解途中のオリゴマーを濃縮回収する条件を検討した。LCMSによる分離と検出条件の検討も併せて行った。pHや通水量、溶出溶媒の検討により希薄サンプルからのオリゴマー回収と検出も可能となった。逆相モードの固相抽出カラムによる濃縮回収では、脂溶性夾雑物が同時に濃縮され、今後微量分析の支障となることが懸念された。そこで始めに活性炭カラムを用いて脂溶性夾雑　物を除去する工程を追加したところ、汚染を軽減することができた。対象オリゴマーの極性が高い場合には本法は有効であったが、極性の低いオリゴマーの場合は活性炭カラムからの溶出が困難であった。本課題が対象とする添加物の場合も同様の課題が生じることが予想されることから分別条件の確立または選択的な検出法が必要と考えられる。

This study aims to explore the possibility of molecular evolution and the construction of an indoor decomposition system by using man-made refractory chemical substances and substrate materials during the decomposition process. In the past year, the production and decomposition of enzymes have been accelerated, and the production and decomposition of enzymes have been accelerated. The production of Poly(3-hydroxybutyrate) depolymerase from bacteria belonging to the genus Escherichia coli and Escherichia coli was studied. In the future, we will discuss the possible conditions for the formation and transformation of related enzymes in Bacillus subtilis. The conditions for the concentration and recovery of the enzyme decomposition products in seawater were discussed. LCMS separation conditions are discussed and implemented. pH, water content, dissolution solvent, etc. Reverse phase extraction, concentration and recovery of fat-soluble compounds, simultaneous concentration and support for future microanalysis Activated carbon is used to remove fat-soluble impurities. For example, if the polarity of the activated carbon is high, the dissolution of the activated carbon is difficult. This topic is related to the case of additive, the same topic is generated, the different conditions are established, and the different methods are necessary.