B細胞共受容体の自己抗原認識機構と自己免疫疾患抑制の構造相関

B细胞共受体自身抗原识别机制与自身免疫性疾病抑制的结构关系

• 批准号: 21K06045
• 负责人: 沼本 修孝
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Tokyo Medical and Dental University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K06045/
• 关键词: X線結晶構造解析; クライオ電子顕微鏡; シグナル伝達; 自己免疫疾患; B細胞

本研究では、B細胞抑制性共受容体CD72と自己抗原Sm/RNPとの複合体の立体構造を決定し、その構造情報に基づき特異的な分子認識機構を解明する。研究二年目の2022年度は、以下の通り研究を実施した。1. ヒト由来CD72リガンド結合ドメインの構造解析前年度の成果により、これまで試料調製が難しかったヒト由来CD72リガンド結合ドメインが安定的に調整できるようになった。結晶化実験の結果、ヒト由来CD72リガンド結合ドメインに特徴的な長い挿入ループ部位を短絡した発現コンストラクトについて、結晶構造解析に成功した。得られた構造から、ヒト由来CD72においては、推定されるリガンド結合部位の分子表面電荷分布は、マウス由来CD72のそれとは大きく異なることが明らかとなった。これにより、CD72のリガンド認識機構における分子間の相補的な電荷分布による寄与以外の認識機構の存在が確実に存在することが示された。2. ヒト由来CD72リガンド結合ドメインとSm/RNPとの複合体試料の調製ヒト由来CD72リガンド結合ドメインの試料調製については、長い挿入ループ部位を保持した試料も調製法を確立した。これについても結晶構造解析を進めると同時に、Sm/RNPとの複合体試料の調製法を検討した。これに伴い、ヒト由来CD72リガンド結合ドメインとSm/RNPなどのリガンド分子との相互作用解析を、表面プラズモン共鳴法（SPR）やELISA法などで行った。これまでのマウス由来CD72リガンド結合ドメインとSm/RNPとの複合体構造解析に加え、ヒト由来CD72リガンド結合ドメインとSm/RNPとの複合体構造解析も行える見通しとなり、試料調製を進めている。

This study で は, B cell inhibitory (let CD72 と their antigen Sm/RNP と の complex の three-dimensional structure を decided し, そ の structure intelligence に base づ き specific molecular understanding な institutions を interpret す る. In the second year of the study, <s:1> 2022 fiscal year た, and the following <s:1> general research を practical application た. 1. ヒ ト origin CD72 リ ガ ン ド combining ド メ イ ン の structure before the annual の results に よ り, こ れ ま で sample modulation が difficult し か っ た ヒ ト origin CD72 リ ガ ン ド combining ド メ イ ン が stable に adjustment で き る よ う に な っ た. Crystallization be 験 の results, ヒ ト origin CD72 リ ガ ン ド combining ド メ イ ン に, 徴 な long い scions into ル ー プ parts を short collaterals し た 発 now コ ン ス ト ラ ク ト に つ い て, crystal structure analytic に successful し た. Have to ら れ た tectonic か ら, ヒ ト origin CD72 に お い て は presumption, さ れ る リ ガ ン ド combining site の molecular surface charge distribution は, マ ウ ス origin CD72 の そ れ と は big き く different な る こ と が Ming ら か と な っ た. こ れ に よ り, CD72 の リ ガ ン ド know institutions に お け る intermolecular の phase of な charge distribution に よ る send and outside の が be truly exist institutions の に exist す る こ と が shown さ れ た. 2. ヒ ト origin CD72 リ ガ ン ド combining ド メ イ ン と Sm/RNP と の complex sample の modulation ヒ ト origin CD72 リ ガ ン ド combining ド メ イ ン の sample modulation に つ い て は, long い scions into ル ー プ parts を keep し た sample を も regulation law establish し た. The crystallization structure is analyzed by を entering めると and simultaneously using に and Sm/RNPと <s:1> complex sample <e:1> preparation method を検 to discuss た. こ れ に い, ヒ ト origin CD72 リ ガ ン ド combining ド メ イ ン と Sm/RNP な ど の リ ガ ン ド molecular と の analytical を interactions, surface プ ラ ズ モ ン resonance (SPR) や ELISA method な ど で line っ た. こ れ ま で の マ ウ ス origin CD72 リ ガ ン ド combining ド メ イ ン と Sm/RNP と の complex structure に え, ヒ ト origin CD72 リ ガ ン ド combining ド メ イ ン と Sm/RNP と の complex tectonic line analytical も え る see tong し と な り, sample modulation を into め て い る.

项目成果

Molecular mechanism of self-antigen recognition by the ligand binding domain of B cell inhibitory co-receptor CD72

B细胞抑制性共受体CD72配体结合域识别自身抗原的分子机制

• 发表时间: 2021
• 作者: Numoto N.;Hirata K.;Akatsu C.;Tsubata T.;Ito N.
• 通讯作者: Ito N.

東京医科歯科大学難治疾患研究所分子構造情報学分野研究概要

东京医科齿科大学疑难杂症研究所分子结构信息学研究概要

B細胞抑制性共受容体CD72のリガンド認識の分子機構

B细胞抑制性共受体CD72配体识别的分子机制

• 发表时间: 2022
• 作者: 沼本修孝，全熙斌，鍔田武志，伊藤暢聡

Structure analysis of human B cell inhibitory co-receptor CD72

人B细胞抑制性共受体CD72的结构分析

• 发表时间: 2022
• 作者: Quan X.;Numoto N.;Tsubata T.;Ito N.
• 通讯作者: Ito N.

Structure Determination from Protein Crystal Clusters by Fully Automatic Data Collection

通过全自动数据收集确定蛋白质晶体簇的结构

• DOI: 10.5940/jcrsj.63.229
• 发表时间: 2021
• 期刊: Nihon Kessho Gakkaishi
• 作者: NUMOTO Nobutaka